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seven9870

新虫 (小有名气)

[求助] 抑菌试验(纸片扩散)可以这样做吗?

前几天用滤纸片法做抑菌测试,用发酵上清液和发酵上清液的乙酸乙酯相分别试验,结果后者有个别出现了抑菌圈,而前者对6种靶标菌都没有抑菌圈出现,有的还在滤纸片上长出菌丝了。请问大家,是否用发酵液乙酸乙酯相做过抑菌试验,这么做有什么不对的地方吗?为什么会出现抑菌圈呢?
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2楼2012-10-23 12:14:13
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3楼2012-10-23 12:14:23
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纸鸢花

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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seven9870: 金币+2, 有帮助 2012-10-28 16:20:12
我们研究的是放线菌,我们不要发酵液的上清液,我们要发酵后离心剩下的菌体,采用甲醇浸提,然后吸取甲醇浸提液进行抑菌试验
每天动一动,收点金币就行了
4楼2012-10-23 12:39:15
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aloon111

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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zhang8826857: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-23 17:08:55
seven9870: 金币+2, 有帮助 2012-10-28 16:20:55
抑菌物质能用乙酸乙酯萃取出来,当然这部分就有抑菌圈了。但发酵上清液应该也有抑菌圈的。你确定乙酸乙酯挥发干净了?也有可能上清液里的其它成分影响了活性成分抑菌
汇天下之贤
5楼2012-10-23 14:05:24
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sailor521

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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seven9870: 金币+2, 有帮助 2012-10-28 16:21:23
应该有一个原来的培养液用乙酸乙酯抽提抽作对照比较能说明问题,个人感觉!
别太放肆,没什么用!
6楼2012-10-23 21:43:09
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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seven9870: 金币+2, 有帮助 2012-10-28 16:22:04
有可能浓度不太够吧,毕竟萃取的话也是一个浓缩的过程。楼主你换算一下萃取液和上清之间浓度能差多少,如果浓度差很多话有可能发酵上清里面浓度不够不足以出抑菌圈~
顺便提一句,滤纸上长出来的菌丝是你抗生素产生菌的菌丝还是测试菌的菌丝?有可能上清残留一点菌体在滤纸上长出来了~
当然楼主也可以考虑用牛津杯来做测活,牛津杯的载量比滤纸要大
7楼2012-10-24 12:53:39
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swaucq

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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seven9870: 金币+2, 有帮助 2012-10-28 16:22:39
发酵上清液含水相物质较多,而抑菌活性物质一般在有机相,所以用发酵上清液做活性效果不好,各种物质相互干扰,没活性,而且含水本身就容易染霉菌。一般用甲醇提取物作活性测试。
不卑不亢
8楼2012-10-24 17:19:49
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