24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (4023)
>导师招生 (428)
>硕博家园 (256)
>虫友互识 (244)
>文献求助 (137)
>考博 (105)
>招聘信息布告栏 (102)
>博后之家 (46)
>休闲灌水 (30)
>论文投稿 (23)
>基金申请 (22)
>有机交流 (21)
>考研 (18)
>找工作 (17)
>公派出国 (17)
>教师之家 (15)

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

ltj1988

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 19.2
帖子: 14
在线: 3.5小时
虫号: 1913925
注册: 2012-07-28
性别: MM
专业: 植物生理与生化

[求助] 蓝白斑筛选后没有目的片段

最近在做重组子的筛选，用的蓝白斑筛选方法，一共做了五个片段的转载，其中三个片段大小在150-200bp，效果都很好；另两个片段大小一个是1100bp左右，另一个是1800bp左右，这两个的平板上也都有白班，但最终的pcr验证却没有想要的片段。五个片段的操作上相同，为什么大片段的就总也转不进去，很费解，求各位高人给分析一下！

回复此楼

» 猜你喜欢

ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析已经有0人回复
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有80人回复
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点已经有0人回复
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？已经有0人回复
His标签蛋白纯化怎么才能快？已经有0人回复
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析已经有0人回复
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用已经有0人回复
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点已经有0人回复
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用已经有0人回复
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点已经有0人回复

没有白费的辛苦

1楼 2012-10-18 10:18:17

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

ltj1988

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 19.2
帖子: 14
在线: 3.5小时
虫号: 1913925
注册: 2012-07-28
性别: MM
专业: 植物生理与生化

送鲜花一朵

引用回帖:

13楼: Originally posted by 太极拳 at 2012-10-22 11:56:28
举个例子，假如片段和载体的浓度都是100ng/uL的话，那么都取1uL，两种质量都是100ng，而片段和载体中，分子大的数目反而小，分子小的数目反而大。对不对？比如说，片段2K，载体5K，那么可以认为片段分子数为50，载体 ...

可以再问您一个比较低级的问题吗？浓度怎么确定的？之前我问过老师，他说根据电泳条带与Marker的亮度估摸一下浓度；一个师姐说她们是用核酸蛋白仪测的，所以想问一下您怎么确定浓度的。