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20111987

金虫 (正式写手)

[求助] 引物二聚体如何识别 已有2人参与

这是我刚跑完的电泳图,用的是2000bp的marker,我的目的条带应该是128bp,如何确定我这儿得到的条带是目的条带还是引物二聚体呢?急求大家帮忙啊!

12.jpg
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20111987

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lillian菲 at 2012-10-17 15:41:47
为什么不换一下小片段的marker呢?你用的marker太大,而目的片段太小,没法对应的看清楚啊

目前我们实验室最小的marker就是2000的了,条件所限吧,我下一步要做荧光定量的,我就是想问一下有没有比较简单的方法排除二聚体的存在便于下一步操作。
7楼2012-10-17 16:55:40
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查看全部 9 个回答

xw19880905

新虫 (小有名气)

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20111987: 金币+1, 有帮助 2012-10-17 15:00:33
这个确实不好看,应该是目的片段,可以用定量PCR跑一下,看看溶解曲线就知道了
2楼2012-10-17 10:54:11
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
20111987: 金币+1, 有帮助 2012-10-17 15:00:42
琼脂糖电泳是有些不容易,去跑下PAGE胶吧。
3楼2012-10-17 11:43:57
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hippo_li

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
20111987: 金币+1, ★★★★★最佳答案 2012-10-17 15:01:13
胶的浓度高一些,100bp左右的可以用1.5%-2%的胶跑,应该能跑开的,引物二聚体一般比100bp的marker条带略小,你的目的条带比100 bp大。
4楼2012-10-17 12:10:19
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