应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 脂质体转染失败的原因
121/2返回列表12下一页
查看: 2765  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xuanxuan2121

银虫 (小有名气)

[求助] 脂质体转染失败的原因

求助，国庆期间，我于10.4和10.6日做了两批脂质体转染，用的LIPO2000，质粒为含EGFP的，结果72小时内10.4的荧光表达效率很高。可是我今天看10.6号做的转染（转染后100h）了，结果荧光表达少的可怜。可是我两次转染的条件，步骤都一样的啊，细胞也是很常见的293。请问大家觉得会是什么原因造成的两批完全不同的转染效率？还有分别配制lipo2000和质粒DNA的时候能不能吹打震荡后再室温静置？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
加油，你是最棒的！
1楼 2012-10-10 19:46:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cool-cj

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
看天: 金币+3, 鼓励分享和交流 2012-10-12 14:27:23
跟细胞状态也有关，转染前一天是否有传一下 对数生长期的细胞是否易转些
两个分别配的时候稍微混下没关系，我一般不会剧烈吹打，两者混在一起的时候要慢滴轻摇
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2012-10-12 10:57:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

diandong

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
2楼2012-10-11 16:41:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuanxuan2121

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by diandong at 2012-10-11 16:41:56
你这时间就不一致啊。

可是有表达的话，100h照样会有很多荧光表达的啊
赞一下 回复此楼
加油，你是最棒的！
3楼2012-10-11 21:26:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuanxuan2121

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cool-cj at 2012-10-12 10:57:49
跟细胞状态也有关，转染前一天是否有传一下 对数生长期的细胞是否易转些
两个分别配的时候稍微混下没关系，我一般不会剧烈吹打，两者混在一起的时候要慢滴轻摇

细胞长得好我就直接拿来转了，没有传代。只是提前一天换了无血清的培养液。。
赞一下 回复此楼
加油，你是最棒的！
5楼2012-10-12 12:24:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cool-cj

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by xuanxuan2121 at 2012-10-12 12:24:11
细胞长得好我就直接拿来转了，没有传代。只是提前一天换了无血清的培养液。。...

之前细胞难道是有血清贴着长的？
赞一下 回复此楼
6楼2012-10-12 12:50:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyingaza

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Lipo2000最怕剧烈吹打，更不能震荡，那样脂质体全部失效了，如此一来你转染效率能高吗？
赞一下 回复此楼
7楼2012-10-12 16:04:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyingaza

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
xuanxuan2121: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-10-16 12:06:46
一般来说，脂质体转染EGFP，48-72h转染效率是最高的，荧光强度会很高，下一轮你可以稍微优化一下条件再做一次看看
赞一下 回复此楼
8楼2012-10-12 16:08:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuanxuan2121

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cool-cj at 2012-10-12 12:50:53
之前细胞难道是有血清贴着长的？...

是的。提前一夜换掉
赞一下 回复此楼
加油，你是最棒的！
9楼2012-10-16 12:02:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuanxuan2121

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by piaoyingaza at 2012-10-12 16:04:55
Lipo2000最怕剧烈吹打，更不能震荡，那样脂质体全部失效了，如此一来你转染效率能高吗？

我是在分开配的时候吹打了下，将lipo2000和质粒混合起来后就轻轻吹打了几下，难道将质粒加入lipo2000一点都不要动？
赞一下 回复此楼
加油，你是最棒的！
10楼2012-10-16 12:05:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xuanxuan2121 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:43 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +3 简单化xn 2026-08-22 7/350 2026-08-22 19:46 by 简单化xn
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭