24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2476  |  回复: 11

xuanxuan2121

银虫 (小有名气)

[求助] 脂质体转染失败的原因

求助,国庆期间,我于10.4和10.6日做了两批脂质体转染,用的LIPO2000,质粒为含EGFP的,结果72小时内10.4的荧光表达效率很高。可是我今天看10.6号做的转染(转染后100h)了,结果荧光表达少的可怜。可是我两次转染的条件,步骤都一样的啊,细胞也是很常见的293。请问大家觉得会是什么原因造成的两批完全不同的转染效率?还有分别配制lipo2000和质粒DNA的时候能不能吹打震荡后再室温静置?
回复此楼
加油,你是最棒的!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cool-cj

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
看天: 金币+3, 鼓励分享和交流 2012-10-12 14:27:23
跟细胞状态也有关,转染前一天是否有传一下 对数生长期的细胞是否易转些
两个分别配的时候稍微混下没关系,我一般不会剧烈吹打,两者混在一起的时候要慢滴轻摇
4楼2012-10-12 10:57:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

diandong

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

2楼2012-10-11 16:41:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuanxuan2121

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by diandong at 2012-10-11 16:41:56
你这时间就不一致啊。

可是有表达的话,100h照样会有很多荧光表达的啊
加油,你是最棒的!
3楼2012-10-11 21:26:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuanxuan2121

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cool-cj at 2012-10-12 10:57:49
跟细胞状态也有关,转染前一天是否有传一下 对数生长期的细胞是否易转些
两个分别配的时候稍微混下没关系,我一般不会剧烈吹打,两者混在一起的时候要慢滴轻摇

细胞长得好我就直接拿来转了,没有传代。只是提前一天换了无血清的培养液。。
加油,你是最棒的!
5楼2012-10-12 12:24:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cool-cj

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by xuanxuan2121 at 2012-10-12 12:24:11
细胞长得好我就直接拿来转了,没有传代。只是提前一天换了无血清的培养液。。...

之前细胞难道是有血清贴着长的?
6楼2012-10-12 12:50:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyingaza

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
Lipo2000最怕剧烈吹打,更不能震荡,那样脂质体全部失效了,如此一来你转染效率能高吗?
7楼2012-10-12 16:04:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

piaoyingaza

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
xuanxuan2121: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-10-16 12:06:46
一般来说,脂质体转染EGFP,48-72h转染效率是最高的,荧光强度会很高,下一轮你可以稍微优化一下条件再做一次看看
8楼2012-10-12 16:08:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuanxuan2121

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by cool-cj at 2012-10-12 12:50:53
之前细胞难道是有血清贴着长的?...

是的。提前一夜换掉
加油,你是最棒的!
9楼2012-10-16 12:02:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuanxuan2121

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by piaoyingaza at 2012-10-12 16:04:55
Lipo2000最怕剧烈吹打,更不能震荡,那样脂质体全部失效了,如此一来你转染效率能高吗?

我是在分开配的时候吹打了下,将lipo2000和质粒混合起来后就轻轻吹打了几下,难道将质粒加入lipo2000一点都不要动?
加油,你是最棒的!
10楼2012-10-16 12:05:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xuanxuan2121 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +6 HanBeiNingZC 2026-03-24 6/300 2026-03-28 07:55 by baoball
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +9 y7czhao 2026-03-26 9/450 2026-03-28 07:53 by Iveryant
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +5 麻辣鱿鱼 2026-03-27 6/300 2026-03-28 04:51 by wxiongid
[考研] 291求调剂 +7 孅華 2026-03-22 7/350 2026-03-28 04:02 by fmesaito
[考研] 0856材料化工调剂 总分330 +10 zhubinhao 2026-03-27 10/500 2026-03-28 03:34 by fmesaito
[考研] 求调剂 +6 白QF 2026-03-21 7/350 2026-03-28 00:42 by 白QF
[考研] 322求调剂 +4 旧吢 2026-03-24 4/200 2026-03-27 15:38 by 不吃魚的貓
[考研] 308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-25 7/350 2026-03-27 14:47 by 狂炫麦当当
[考研] 考研化学308分求调剂 +10 你好明天你好 2026-03-23 12/600 2026-03-27 14:43 by shangxh
[考研] 321求调剂 +4 璞玉~~ 2026-03-25 4/200 2026-03-27 11:41 by sanrepian
[考研] 085600材料与化工306 +10 z1z2z3879 2026-03-21 11/550 2026-03-27 11:31 by wangjy2002
[考研] 求调剂 +8 Auroracx 2026-03-22 8/400 2026-03-26 19:55 by 不吃魚的貓
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 0856求调剂 +8 zhn03 2026-03-25 9/450 2026-03-26 13:42 by zzll406
[考研] 寻找调剂 +5 倔强芒? 2026-03-21 8/400 2026-03-26 13:25 by 0906ljy
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap- 2026-03-22 10/500 2026-03-26 13:11 by 公瑾逍遥
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
信息提示
请填处理意见