24小时热门版块排行榜    

查看: 1835  |  回复: 7
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

review

银虫 (著名写手)

[交流] 克隆时做酶切,只切载体还是连要插入载体的片段也要酶切呢? 已有5人参与

我的实验:扩增获得片段后连在载体上,再转到大肠杆菌里。
片段与载体连接时,是不是先给载体做个酶切?片段也要做吗  片段已经加A了
回复此楼
交流
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

review

银虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gwd0312 at 2012-10-10 16:41:10
既然要将你的目的片段连接到表达载体上,那你的载体和你的片段肯定都是要酶切的啊,你设计引物时就应该考虑了啊,而且这两次酶切用到的内切酶要一致,这样黏性末端才会互补,才能保证你后面可以连接上去啊!

设计引物时要考虑哪些?请指教   谢谢了!  我初学者
交流
4楼2012-10-10 17:19:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1949stone: 金币+2, 鼓励一下 2012-10-10 16:51:44
既然要将你的目的片段连接到表达载体上,那你的载体和你的片段肯定都是要酶切的啊,你设计引物时就应该考虑了啊,而且这两次酶切用到的内切酶要一致,这样黏性末端才会互补,才能保证你后面可以连接上去啊!
持之以恒、永不放弃!
2楼2012-10-10 16:41:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zy_rebecca

新虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1949stone: 金币+1, 鼓励 2012-10-10 16:51:35
要的呀,要切出相同的粘性末端才能连接
3楼2012-10-10 16:42:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heyin89

禁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

5楼2012-10-10 17:28:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 266求调剂 +5 阳阳哇塞 2026-03-14 9/450 2026-03-18 15:05 by stone_128
[考研] 化学工程321分求调剂 +15 大米饭! 2026-03-15 18/900 2026-03-18 14:52 by haxia
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 312求调剂 +8 陌宸希 2026-03-16 9/450 2026-03-18 12:39 by Linda Hu
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 211本,11408一志愿中科院277分,曾在中科院自动化所实习 +6 Losir 2026-03-12 7/350 2026-03-17 12:09 by danranxie
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 土木第一志愿276求调剂,科研和技能十分丰富,求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
信息提示
请填处理意见