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say-jeremy新虫 (初入文坛)
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[求助]
求指点 青春双歧杆菌分子鉴定
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设计青春双歧杆菌引物、并使用通用引物，但是PCR产物跑胶后没有一条条带， 求高手指教，有做过青春双岐杆菌菌种鉴定的么？ |
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asdkingstar
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2楼2012-10-09 14:47:00
Marado
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+4, 鼓励应助 2012-10-09 15:49:16
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小丹木木: 金币+4, 鼓励应助 2012-10-09 15:49:16
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菌株鉴定，无非真核原核区别，原核16s，真核18s 我们实验室做的很多，拿16s来说，PCR不出条带的可能性很小呐，因为就算是水，只要不是非常干净，都能P出来条带，可能的原因有： 1：检查一下你们用的酶，通用引物（这个重点检查，污染可能性高）看看是不是被污染了，最好全部换掉再做 2：PCR条件？PCR的条件大致都一样，退火温度52~55℃都可以 3：没条带，是胶一片漆黑，还是只有Mark，如果连Mark都没有的话，那就是跑胶问题了，重新配胶吧，不过这个可能性不大 PS：祝楼主好运，菌株鉴定是分子入门实验，但是这一套做下来，也算入门了. |
3楼2012-10-09 15:09:07
4楼2014-12-21 20:37:38