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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求指点 青春双歧杆菌分子鉴定
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say-jeremy

新虫 (初入文坛)

[求助] 求指点 青春双歧杆菌分子鉴定

设计青春双歧杆菌引物、并使用通用引物，但是PCR产物跑胶后没有一条条带，求高手指教，有做过青春双岐杆菌菌种鉴定的么？
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1楼 2012-10-09 13:02:11
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+4, 鼓励应助 2012-10-09 15:49:16
菌株鉴定，无非真核原核区别，原核16s，真核18s
我们实验室做的很多，拿16s来说，PCR不出条带的可能性很小呐，因为就算是水，只要不是非常干净，都能P出来条带，可能的原因有：
1：检查一下你们用的酶，通用引物（这个重点检查，污染可能性高）看看是不是被污染了，最好全部换掉再做
2：PCR条件？PCR的条件大致都一样，退火温度52~55℃都可以
3：没条带，是胶一片漆黑，还是只有Mark，如果连Mark都没有的话，那就是跑胶问题了，重新配胶吧，不过这个可能性不大
PS：祝楼主好运，菌株鉴定是分子入门实验，但是这一套做下来，也算入门了.
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Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
3楼2012-10-09 15:09:07
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asdkingstar

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主不要悲伤，我刚一开始接触这方面实验，每做一步都会卡很长时间。
赞一下 回复此楼
爱是浅浅的喜欢，喜欢是浅浅的爱。
2楼2012-10-09 14:47:00
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吕晓彤

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Marado at 2012-10-09 15:09:07
菌株鉴定，无非真核原核区别，原核16s，真核18s
我们实验室做的很多，拿16s来说，PCR不出条带的可能性很小呐，因为就算是水，只要不是非常干净，都能P出来条带，可能的原因有：
1：检查一下你们用的酶，通用引物（ ...

我想问一下  我是本科生 明天要送双歧杆菌的PCR扩增的去测序了但是查不到测序长度是多少？我用的引物是27和1492
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4楼2014-12-21 20:37:38
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