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say-jeremy

新虫 (初入文坛)

[求助] 求指点 青春双歧杆菌分子鉴定

设计青春双歧杆菌引物、并使用通用引物,但是PCR产物跑胶后没有一条条带,求高手指教,有做过青春双岐杆菌菌种鉴定的么?
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吕晓彤

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by Marado at 2012-10-09 15:09:07
菌株鉴定,无非真核原核区别,原核16s,真核18s
我们实验室做的很多,拿16s来说,PCR不出条带的可能性很小呐,因为就算是水,只要不是非常干净,都能P出来条带,可能的原因有:
1:检查一下你们用的酶,通用引物( ...

我想问一下  我是本科生 明天要送双歧杆菌的PCR扩增的去测序了但是查不到测序长度是多少?我用的引物是27和1492
4楼2014-12-21 20:37:38
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asdkingstar

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主不要悲伤,我刚一开始接触这方面实验,每做一步都会卡很长时间。
爱是浅浅的喜欢,喜欢是浅浅的爱。
2楼2012-10-09 14:47:00
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+4, 鼓励应助 2012-10-09 15:49:16
菌株鉴定,无非真核原核区别,原核16s,真核18s
我们实验室做的很多,拿16s来说,PCR不出条带的可能性很小呐,因为就算是水,只要不是非常干净,都能P出来条带,可能的原因有:
1:检查一下你们用的酶,通用引物(这个重点检查,污染可能性高)看看是不是被污染了,最好全部换掉再做
2:PCR条件?PCR的条件大致都一样,退火温度52~55℃都可以
3:没条带,是胶一片漆黑,还是只有Mark,如果连Mark都没有的话,那就是跑胶问题了,重新配胶吧,不过这个可能性不大
PS:祝楼主好运,菌株鉴定是分子入门实验,但是这一套做下来,也算入门了.
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
3楼2012-10-09 15:09:07
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