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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒酶切之后电泳呈弥散状是什么原因
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路程

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒酶切之后电泳呈弥散状是什么原因

从点样孔就开始弥散~~~~~~~~~~~
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1楼 2012-09-25 19:51:35
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 鼓励应助 2012-09-26 14:27:54
嗯........................
       先记得上原质粒，原质粒没错的话就是酶切问题，觉得会有几种可能
       1. 酶坏了
       2. 不恰当酶切反应体系下的星号活性
       3. 不能长时间酶切的酶进行了过夜酶切
       如果你写的更详细点，会帮你更好的分析~
       个人看法 若有说错请高手指点
赞一下(2人) 回复此楼
Let God do with it as He wills
3楼2012-09-25 23:44:23
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无疆@行者

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-26 14:27:43
MARKER呢？正常吗，有时候是凝胶有问题会造成拖尾；还有就是质粒不纯，酶切切弥散了
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2012-09-25 23:43:16
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普通回帖

fhda142

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
loading Bufffer有没有问题啊？
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4楼2012-09-26 08:56:36
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路程

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 无疆@行者 at 2012-09-25 23:43:16
MARKER呢？正常吗，有时候是凝胶有问题会造成拖尾；还有就是质粒不纯，酶切切弥散了

maker正常，一起跑的其他样品也正常，请教一下，质粒不纯酶切为何会弥散呢？
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5楼2012-09-27 13:02:24
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路程

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fhda142 at 2012-09-26 08:56:36
loading Bufffer有没有问题啊？

没有问题，一起跑的其他样品均正常
赞一下 回复此楼
6楼2012-09-27 13:03:14
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路程

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-09-25 23:44:23
嗯........................
       先记得上原质粒，原质粒没错的话就是酶切问题，觉得会有几种可能
       1. 酶坏了
       2. 不恰当酶切反应体系下的星号活性
       3. 不能长时间酶切的酶进行了过夜酶切 ...

谢谢您的回复~~~~~~~~
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7楼2012-09-27 13:04:50
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david0308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
其实如果不是酶出问题乱切的话最有可能的就是原质粒降解了...
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哈哈
8楼2012-09-27 13:40:22
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路程

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by david0308 at 2012-09-27 13:40:22
其实如果不是酶出问题乱切的话最有可能的就是原质粒降解了...

谢谢您的回复，酶切后用未酶切的质粒一起跑了跑，没有降解~~~~~~~
赞一下 回复此楼
9楼2012-09-27 13:49:03
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-28 14:49:35
（1）说明里面有多个酶切位点，酶切时间2个小时或更长时间没有影响，没有酶切位点是切不开的。
（2）你的内切酶有污染，其他人操作的时候把其他酶污染到你用的酶里了。
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10楼2012-09-27 15:05:48
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