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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 考马斯亮蓝测吸光度极不稳定
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joinxufei

新虫 (初入文坛)

[求助] 考马斯亮蓝测吸光度极不稳定

我的蛋白质浓度是从50 - 500 好像有点偏大，还有大概放置时间在10min左右开始测吸光度，吸光数值跳动幅度很大，而且无法成线性关系。想请问是要在5min内测定还是由于其他什么操作不当导致。
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1楼 2012-09-23 23:52:19
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琴瑟不鸣

铁虫 (小有名气)
你可以把你要测得样品按一定倍数稀释一下 试试
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老虎
2楼2012-09-24 08:42:36
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joinxufei

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 琴瑟不鸣 at 2012-09-24 08:42:36
你可以把你要测得样品按一定倍数稀释一下 试试

那做标线的时候吸光度一直不稳定是由于什么呢？
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3楼2012-09-24 10:15:45
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wzqno

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
换BCA法吧，还是比较稳定的，也挺快的，价格也不贵
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4楼2012-09-24 16:10:42
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琴瑟不鸣

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by joinxufei at 2012-09-24 10:15:45
那做标线的时候吸光度一直不稳定是由于什么呢？...

不知道你用的考马斯亮蓝是哪一种，以前我们实验室有两种，一种是用来染蛋白胶的，测溶液的时候就不太稳定阿，后来换了就好了。呵呵
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老虎
5楼2012-09-25 15:54:45
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beishui

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我测的样本在200ug一下的时候才有线性的
你最好还是做一个广义的曲线，之后看一下在那个范围内的线性比较好，之后就按照那个区间去做，吧你自己的样本稀释成这个样子的就可以了
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宠辱不惊，看庭前花开花落；去留无意，望天上云卷云舒。
6楼2012-09-28 14:04:16
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beishui

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般测蛋白含量的是G250
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宠辱不惊，看庭前花开花落；去留无意，望天上云卷云舒。
7楼2012-09-28 14:04:48
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httarea

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by beishui at 2012-09-28 14:04:16
我测的样本在200ug一下的时候才有线性的
你最好还是做一个广义的曲线，之后看一下在那个范围内的线性比较好，之后就按照那个区间去做，吧你自己的样本稀释成这个样子的就可以了

你好，可以问一下你们换了之后的考马斯亮蓝是从哪里买的那种规格的吗？
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失败乃成功之母
8楼2013-12-20 14:46:11
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