应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒电泳问题
51/1返回列表
查看: 1706  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xuyan_1215

新虫 (小有名气)

[求助] 质粒电泳问题

最近做酶切，遇到一个非常神奇的事情。 希望大家能够解释下，非常感谢！
1.双酶切后，质粒大小与理论符合；
2.原质粒没有酶切，但是却比酶切后的质粒跑得慢！！！
一般质粒提出来之后以超螺旋形态的居多，而且超螺旋在电泳中的迁移速度最快，为什么会跑在线性的之后呢？真神奇，几次都是同样的结果，是不是质粒有问题啊？我用宝生物、生工的试剂盒提取了之后都是这样，这是怎么回事呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-09-20 10:51:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuyan_1215

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-20 13:03:08
楼主能不能把质粒的情况说的具体点，是载体质粒？大小大概是多少？如果能附图就更好了

我的质粒是pET28a，5.3kb左右，用的marker是5000的，如图所示，marker旁边的是原质粒，其次是双酶切之后的质粒，结果很匪夷所思。。。请你帮忙分析看看。
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-20 14:31:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主能不能把质粒的情况说的具体点，是载体质粒？大小大概是多少？如果能附图就更好了
赞一下 回复此楼
有时候，一句话，可以改变未来
2楼2012-09-20 13:03:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuyan_1215

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ysn5048 at 2012-09-20 13:03:08
楼主能不能把质粒的情况说的具体点，是载体质粒？大小大概是多少？如果能附图就更好了

附图如下：

Administrator 2012-09-19 16hr 40min.jpg
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-20 14:34:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ysn5048

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
xuyan_1215: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-09-22 09:57:29
从楼主图上来看，原质粒的位置大概在7000左右的位置，但如果5300环状质粒跑的位置应该是在4300线性位置，所以无论如何这个都不是pET28a，很有可能是pET28a插入了较大的目的片段，楼主还需要自己回想下有没有拿错菌，提错质粒。还有，希望楼主用15Kb的Marker跑，可以看得清楚点，毕竟5.3kb已经超出了5000的范畴。
赞一下 回复此楼
有时候，一句话，可以改变未来
5楼2012-09-20 16:06:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭