24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
查看: 2885  |  回复: 19
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

静音0108

银虫 (初入文坛)

[求助] 做双酶切 跑胶后什么都没有 是怎么回事?

众位虫子们  帮帮忙啊  谁遇到过这种状况  
质粒和DNA片段做双酶切后  跑胶后什么都没有  一片空白。用于酶切的质粒和片段在酶切前跑胶是有条带的 ,为何切后什么都没了?我37℃酶切了7小时,即使是时间过长了 ,也应该有弥散的吧?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

静音0108

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by skuy1223 at 2012-09-19 16:11:48
个人感觉楼主可以从以下几个方面来判断一下:第一是看溴酚蓝是否跑走了,如果跑走了,应该电泳缓冲液就没有问题;第二是加大一下上样量,有时候酶切过后的条带比未酶切的条带要弱(我也碰到这样的问题,不清楚为什么 ...

跑胶的时候我的酶切产物全部加进去了,共30ul。30ul的酶切体系中,DNA片段用了20ul的,量应该够大了吧。质粒用了5ul的,体系是20ul,也是全部上样了的,可是就是什么都没有
另外,用酶切产物做pcr是怎么个意思?如果是pcr没条带就是降解了?
11楼2012-09-20 16:06:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

酶切专家

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
静音0108: 金币+1 2012-11-10 18:42:00
你电泳时有没有酶切的质粒或DNA对照吗?不会是没加EB吧?
2楼2012-09-18 21:57:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

尚慕寒

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
静音0108: 金币+1 2012-11-10 18:42:13
没带MARKER?完全空白估计是忘记加EB了吧
高山仰止,景行行止,虽不能至,心向往之。
3楼2012-09-18 23:13:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无疆@行者

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
静音0108: 金币+1 2012-11-10 18:42:27
你用MARKER,酶切前后产物,一起跑一下。7个小时感觉时间太长了,酶的活性很高,3个小时感觉就可以了
4楼2012-09-18 23:48:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见