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dingruicnooc

铁虫 (小有名气)

[求助] 请教高人一个荧光和散射的问题

比方说有一个荧光分子,激发波长500nm发射波长550nm,将其标记在一个载体上之后,
这个载体在此激发波长处的散射强度太大了,把荧光的峰都遮盖住了,想问问各位高人
有没有什么办法能避免这个问题呢?我试了在比较短的波长处激发,比方说450nm,散
射峰还是很强以至于荧光的发射峰基本都看不见了。
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cutemm

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
soundhorizo: 金币+1, 应助指数+1 2012-09-15 20:11:34
具体怎么设置,你可以查仪器说明书,或者直接找仪器厂家工程师问问即可。一般情况下是设置波长来避开散射光,但是散射太大,比如你这种情况,我觉得滤掉该波长是最好的。
8楼2012-09-15 20:11:09
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gzzhiyoux

金虫 (小有名气)

金虫

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 感谢应助,欢迎常来分析版交流 ^ ^ 2012-09-14 17:09:28
投机点的办法就是看你散射峰覆盖哪一段,换另外一种最大发射波长比这长或短的荧光分子标记,呵呵!
自强不息
2楼2012-09-14 15:21:35
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gzzhiyoux

金虫 (小有名气)

金虫

【答案】应助回帖

另外看你那个散射是拉曼散射峰,还是普通反射峰,普通反射一般波长跟入射光波长相等,你可以试试其他大于或小于500nm的入射光激发,荧光发射峰位置不会受影响,可能强弱会跟最大激发(500nm)有点差异,扣空白就没影响了!
自强不息
3楼2012-09-14 15:25:58
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dingruicnooc

铁虫 (小有名气)

空白扣除也没用啊,散射峰太宽太强,把荧光信号都覆盖住了。
4楼2012-09-15 10:21:37
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