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bolomeer

铜虫 (小有名气)

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[交流] 实时定量拷贝数

请教大家一个问题，我用实时定量人gDNA，同一份样本做了两次实验，由于标曲不一样，扩增效率也不一样，仪器条件不一样，所以定量拷贝数不一样，这我可以理解。那么结果相差多大是正常的，也就是说同一份样本两次定量结果没有显著性差异？

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1楼 2012-09-14 10:00:49

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chenguestc

木虫 (职业作家)

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虫号: 1337860

★ ★ ★
bolomeer(金币+1): 谢谢参与
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-14 16:28:31

所有试验请用同一机器。
楼主，做2次标准曲线的目的是什么？是为了确证重复性嘛？
同一个机器做出的标准曲线差异不会很大，细微差异肯定会有。如果两次扩增效率差异很大，应该是操作有问题，即技术重复性不好。
我的理解是，一旦标准曲线被做出来，后续所有试验请用同样操作，包括枪头，加样的枪等全部用一致的，这样才有可比性。