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yyout002

金虫 (小有名气)

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1楼 2012-09-12 16:18:26

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杨攀1991

新虫 (初入文坛)

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专业: 区域环境化学

【答案】应助回帖

实验试剂
①甲苯
②10%尿素
③柠檬酸盐缓冲液：分别称取368g柠檬酸溶于600ml水；295g氢氧化钾溶于1000ml蒸馏水，将两溶液合并，用1M氢氧化钠将pH调至6.7，用蒸馏水稀释至2000ml。
④苯酚钠溶液：A、将62.5g苯酚溶于少量乙醇，加2ml甲醇和18.5ml丙酮，用乙醇稀释至100ml；B、27g氢氧化钠溶于100ml水，将两溶液保存在冰箱里。使用前将溶液A与溶液B各20ml混合，用蒸馏水稀释至100ml。
⑤次氯酸钠溶液：用蒸馏水稀释试剂，至活性氯的浓度为0.9%，溶液稳定。
⑥标准溶液：一、称取0.4717g硫酸铵溶于水，稀释至1000ml（1ml含100ug氮），可将此溶液稀释10倍供用；
标曲绘制：往50ml容量瓶中分别注入1ml、3ml、5ml、7ml、9ml、11ml及13ml标准溶液，加蒸馏水至20ml，再加4ml苯酚钠溶液和3ml次氯酸钠溶液，随加随摇匀，20分钟后显色，定容至50ml，1小时内在分光光度计上于578nm处比色，根据光密度值与溶液浓度绘制标准曲线。

操作步骤
①称取5g过1mm筛的风干土样，置于100ml三角瓶中，加1ml甲苯。
②甲苯处理15分钟后，往瓶中注入10ml 10%尿素溶液和20ml 柠檬酸盐缓冲液（PH6.7），仔细混合。
③将瓶在37℃恒温箱中放置24h后，过滤后取3ml滤液注入50ml容量瓶平中。用蒸馏水稀释至10ml，然后加入4ml苯酚钠溶液，并立即加入3ml次氯酸钠溶液，随加随摇匀。加入每一试剂后，立即将混合物仔细混合。
④与此同时，对每一土样设置用水代替基质的对照，对整个试验，设置无土壤的对照，一检验试剂的纯度。
⑤20分钟后显色，定容至50ml，1小时内在分光光度计上于578nm处比色用1㎝的比色槽，在比色计上于波长578nm处测定颜色的深度（靛酚的青色能在60分钟内保持稳定）。用供试样品所得的消光值减去对照样品消光值的差，根据标准曲线求出氨态氮量。
⑧土壤的脲酶活性，以每一克土的氨氮的毫克数表示，其计算式如下：
氨氮（mg）=A*2； A：从标准曲线查的的氨氮毫克数； 2：换算成1克土的系数
我也在开始这个东西，以上方法是中科院一个同学给我的，共享下~

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