| 查看: 1484 | 回复: 7 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
wujibifan新虫 (小有名气)
|
[求助]
求助-基因的突变文库相关问题 已有1人参与
|
|
|
给位大侠，小弟最近在构建一个基因的突变文库，具体流程是：先克隆该基因，连到一个穿梭载体上，测序确定该基因后，进行易错PCR，来得到该基因的突变体，然后和之前同样的载体连接，转化大肠杆菌，进而构建突变文库。 现遇到的问题：转化率太低，每次转化就长几个菌，导致文库的容量不够，没有代笔性。 求助：请各位大侠帮帮我，我该在那些地方改进呢？我已验证酶切效果很好，转化过程中设置了阳性对照，转化也很好，估计是连接过程出问题？目的片段与载体的摩尔比很重要吗？用哪个公司的连接酶效果会好些？我用过TAKARA，Promega的，效果都差不多。缓冲液失效了？ [ Last edited by 1949stone on 2012-9-13 at 07:43 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有268人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请各位大侠帮忙……TLC显色剂问题！！！！
已经有11人回复
- 请各位大侠帮忙，燃料电池初入门
已经有6人回复
- 烦请各位大侠帮忙
已经有11人回复
- 求大侠帮忙解决一个B类错误！！谢谢
已经有5人回复
- 请各位大侠帮忙看看如何修改
已经有6人回复
- 请各位大侠帮忙：氨曲南的生产能否在青霉素车间？？？谢谢！~
已经有8人回复
- 请各位大侠帮忙看看：煤堆自燃边界条件设置问题。谢谢！
已经有6人回复
- 环氧树脂成膜控制厚度问题，希望各位大侠帮忙！
已经有7人回复
- 请各位大侠帮忙看一下我的液相色谱图究竟怎么了？
已经有13人回复
- 【求助】急！哪位大侠帮忙算算...
已经有8人回复
- 请大侠帮忙推荐下笔记本
已经有42人回复
- 文章回来，请大侠帮忙看看
已经有8人回复
- 【求助】请各位大侠帮忙推荐几种比较耐水的气相色谱柱~~
已经有5人回复
- 各位大侠帮帮忙吧
已经有11人回复
7楼2013-10-15 22:16:32
无疆@行者
银虫 (小有名气)
- 应助: 60 (初中生)
- 金币: 241.8
- 散金: 362
- 帖子: 288
- 在线: 214.6小时
- 虫号: 1416887
- 注册: 2011-09-25
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
2楼2012-09-13 00:18:09
墨香若水
木虫 (著名写手)
小小囧虫
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 3059.1
- 散金: 942
- 红花: 10
- 沙发: 1
- 帖子: 1408
- 在线: 255.2小时
- 虫号: 528502
- 注册: 2008-03-19
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
3楼2012-09-13 14:26:15
wujibifan
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 28.8
- 散金: 72
- 帖子: 63
- 在线: 123.7小时
- 虫号: 836450
- 注册: 2009-08-29
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
4楼2012-09-19 20:18:31
10