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fishfinger2

新虫 (初入文坛)

[求助] 叶绿素自发荧光如何去除(求助)

我做的是植物叶片的树脂切片,然后准备用抗体进行杂交,可是发现在淀粉粒表面的叶绿素自发荧光非常强,已经严重的影响了我去观察抗体杂交位置,有谁做过植物叶片的切片并有好的方法去除自发荧光?
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyfgood: 金币+3, 很有帮助! 2012-09-11 23:07:23
fishfinger2: 金币+5 2012-09-13 14:45:54
观察的时候加合适滤光片(滤去600 nm以上的)应该就可以解决这个问题。
类似楼主的工作我没做过,但在观察GFP标记蛋白表达时,叶绿体自发荧光我们一般都在confocal上单独设一个600 nm以上通道观察。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2012-09-11 19:34:45
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fishfinger2

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-09-11 19:34:45
观察的时候加合适滤光片(滤去600 nm以上的)应该就可以解决这个问题。
类似楼主的工作我没做过,但在观察GFP标记蛋白表达时,叶绿体自发荧光我们一般都在confocal上单独设一个600 nm以上通道观察。

先谢谢,我自己再尝试一下
3楼2012-09-13 14:45:50
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fishfinger2

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2012-09-11 19:34:45
观察的时候加合适滤光片(滤去600 nm以上的)应该就可以解决这个问题。
类似楼主的工作我没做过,但在观察GFP标记蛋白表达时,叶绿体自发荧光我们一般都在confocal上单独设一个600 nm以上通道观察。

对不起,我看了一下把600nm以上的光屏蔽掉好像也不可以吧,因为叶绿素的荧光在570nm左右发射,
4楼2012-09-13 15:07:48
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taxoly

铁虫 (著名写手)

将叶绿素样品事先 通入氧气已饱和 后在观察荧光是否减弱 活淬灭!
一片冰心在木虫
5楼2013-01-28 18:25:19
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xy531483760

金虫 (小有名气)

用吖啶橙可不可以?虽然会染色细胞核但是不会让叶绿素发光了吧
比较笨的小虫虫
6楼2015-10-21 14:09:30
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