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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于taq酶后加A的交流
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新虫 (正式写手)

[交流] 关于taq酶后加A的交流 已有6人参与

平时我们用taq进行pcr时，是pcr每一轮的72度都加一个A，还是最后72度10min时再加上的呢？如果一个小片段扩增时间过长 是否就会在尾巴上加AAAA....？
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aofeng860308

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1楼 2012-09-11 11:28:47
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awenrou

木虫 (小有名气)
加一个A 后就不再加了，这是Taq 的属性，最后结果是只加一个A
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7楼2012-09-13 17:28:17
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wzqno

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-11 16:00:44
每一循环PCR都应该加一个A，但是不会形成PolyA的，因为每循环PCR都是在引物的基础上开始扩增的，引物不会识别增加的A的，就好像可以在很长的DAN片度中只扩增其中一部分似的，所以不用担心
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2楼2012-09-11 15:29:43
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aofeng860308

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送鲜花一朵
最终的结果是在每一个DNA分子双链的3-端加一个A，不会形成所谓的polyA结构。TA克隆就是运用这个结果而进行的连接。
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3楼2012-09-11 22:34:35
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小小技术官

木虫 (正式写手)
楼主想象力丰富。。
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生活是一面镜子，要笑着面对！
4楼2012-09-11 23:43:02
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