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新虫 (正式写手)

[交流] 关于taq酶后加A的交流 已有6人参与

平时我们用taq进行pcr时,是pcr每一轮的72度都加一个A,还是最后72度10min时再加上的呢?如果一个小片段扩增时间过长 是否就会在尾巴上加AAAA....?
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wzqno

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-11 16:00:44
每一循环PCR都应该加一个A,但是不会形成PolyA的,因为每循环PCR都是在引物的基础上开始扩增的,引物不会识别增加的A的,就好像可以在很长的DAN片度中只扩增其中一部分似的,所以不用担心
2楼2012-09-11 15:29:43
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aofeng860308

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
送鲜花一朵
最终的结果是在每一个DNA分子双链的3-端加一个A,不会形成所谓的polyA结构。TA克隆就是运用这个结果而进行的连接。
3楼2012-09-11 22:34:35
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小小技术官

木虫 (正式写手)

楼主想象力丰富。。
生活是一面镜子,要笑着面对!
4楼2012-09-11 23:43:02
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
最后的形式在是原来的片段基础上两个3撇端均加上一个A
5楼2012-09-12 08:29:22
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awenrou

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
加一个A 后就不再加了,这是Taq 的属性,最后结果是只加
6楼2012-09-13 17:27:59
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awenrou

木虫 (小有名气)

加一个A 后就不再加了,这是Taq 的属性,最后结果是只加一个A
7楼2012-09-13 17:28:17
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babyjiang

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by wzqno at 2012-09-11 15:29:43
每一循环PCR都应该加一个A,但是不会形成PolyA的,因为每循环PCR都是在引物的基础上开始扩增的,引物不会识别增加的A的,就好像可以在很长的DAN片度中只扩增其中一部分似的,所以不用担心

请问一下,TAKARA的Taq酶加A么?
8楼2014-11-26 11:10:59
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