24小时热门版块排行榜    

查看: 2516  |  回复: 10

wangchao_207

金虫 (小有名气)

[求助] 凝胶过滤层析中遇到的问题,求解

蛋白质浓度很低,想要通过凝胶过滤层析分离纯化目的蛋白,是不是这种浓度太低的蛋白基本上没有分离效果啊??求解,谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

加油吧奋斗吧
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

herizonyan

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lovibond: 金币+1, 鼓励新虫发帖 2012-09-12 08:28:16
浓度低的话就先浓缩一下再做分离吧~
虽然说应该是跟浓度关系不太大的。
3楼2012-09-11 22:19:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

396101466

金虫 (正式写手)

一段遗失的美好

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
树树8013: 回帖置顶 2012-09-13 21:42:37
树树8013: 金币+2, 谢谢解答,请继续关注咱们食品人自己的食品板块。 2012-09-13 21:42:59
看了别人的回复我想说明以下几个问题:
第一,对于一个固定的凝胶柱来说,上样体积是一定的,如果蛋白质浓度较低,那么该柱子的分离效率就比较低,所以就要求上样前对样品进行浓缩,来提高柱子的效率,要不然就费时间,费力气,最终得到的效果还不好!
第二,蛋白质浓度的测定有很多方式,最简单的方式就是用蛋白微量检测仪进行测定,这样可以直接得到结果,如果没有这样的仪器,只有用其他的检测方法了。如试剂盒检测:BCA法测蛋白浓度,Bradford法,Lowry法等等,这些都有标准的操作方法的!
希望对你有用!
人生的三大悲剧:不知道选择,不坚持选择,不断选择!
7楼2012-09-12 12:07:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

396101466

金虫 (正式写手)

一段遗失的美好

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 396101466 at 2012-09-12 12:07:21
看了别人的回复我想说明以下几个问题:
第一,对于一个固定的凝胶柱来说,上样体积是一定的,如果蛋白质浓度较低,那么该柱子的分离效率就比较低,所以就要求上样前对样品进行浓缩,来提高柱子的效率,要不然就费时 ...

对了,还忘记了一个问题,浓缩的方式有很多,保留生物活性的可以用一定截留分子量的透析袋透析,或者是用超滤管离心浓缩,这些是我们常用的.........
人生的三大悲剧:不知道选择,不坚持选择,不断选择!
8楼2012-09-12 12:09:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

vvsober

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
lovibond: 金币+1, 鼓励应助 2012-09-12 08:28:03
凝胶层析是分子筛作用哇。和分子量有关系,但和浓度有什么关系。。只不过浓度太低的话,收集到的物质就更稀了,不好检测到了吧。。
选择出色
2楼2012-09-11 20:20:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangchao_207

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by herizonyan at 2012-09-11 22:19:13
浓度低的话就先浓缩一下再做分离吧~
虽然说应该是跟浓度关系不太大的。

恩,用什么方法浓缩呢?因为我的目的蛋白还得保持活性
加油吧奋斗吧
4楼2012-09-12 07:57:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangchao_207

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by vvsober at 2012-09-11 20:20:25
凝胶层析是分子筛作用哇。和分子量有关系,但和浓度有什么关系。。只不过浓度太低的话,收集到的物质就更稀了,不好检测到了吧。。

是啊,看文献上最好浓缩一下
加油吧奋斗吧
5楼2012-09-12 07:57:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

herizonyan

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by wangchao_207 at 2012-09-12 07:57:30
是啊,看文献上最好浓缩一下...

我一般是用真空旋转蒸发仪,可以保持温度低于100度。
6楼2012-09-12 09:27:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangchao_207

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 396101466 at 2012-09-12 12:07:21
看了别人的回复我想说明以下几个问题:
第一,对于一个固定的凝胶柱来说,上样体积是一定的,如果蛋白质浓度较低,那么该柱子的分离效率就比较低,所以就要求上样前对样品进行浓缩,来提高柱子的效率,要不然就费时 ...

谢谢
加油吧奋斗吧
9楼2012-09-13 08:51:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangchao_207

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 396101466 at 2012-09-12 12:09:50
对了,还忘记了一个问题,浓缩的方式有很多,保留生物活性的可以用一定截留分子量的透析袋透析,或者是用超滤管离心浓缩,这些是我们常用的............

好的,我用透析袋试过,效果不理想,我这次用超滤试试吧,谢谢
加油吧奋斗吧
10楼2012-09-13 08:52:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wangchao_207 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +37 医学老男孩 2026-08-13 86/4300 2026-08-18 00:18 by longsantaizi
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +4 基诺咪客 2026-08-17 4/200 2026-08-17 16:10 by Vivilian
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
请填处理意见