24小时热门版块排行榜    

查看: 1643  |  回复: 4

yy054120012

铁虫 (初入文坛)

[求助] 用triton x-100都分不开的蛋白

想请教各位童鞋。我做天然产物分离纯化,有几个蛋白杂在一起的复合物。在文库里都克隆了相关基因。我用加了triton x-100的缓冲buffer来过分子筛都无法将他们分开,怎么办呢?之前还用较高浓度的triton x-100处理过蛋白。但就是打不开他们的分子间作用。过下来的还是杂在一起。不知道有没有其他办法。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以试试Tricin SDS-PAGE看看
2楼2012-09-09 19:58:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilxly

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以加适当SDS到buffer里面,0.5%-1%左右对蛋白不会变性
3楼2012-09-10 12:02:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yy054120012

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ilxly at 2012-09-10 12:02:35
可以加适当SDS到buffer里面,0.5%-1%左右对蛋白不会变性

我也想到这点了。但是我用0.15%预处理样品。怎么都有絮状沉淀了?无比郁闷
4楼2012-09-12 21:31:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yy054120012

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by reallpf at 2012-09-09 19:58:43
可以试试Tricin SDS-PAGE看看

你好, 呵呵,是这样的。我现在需要大量的获取蛋白,而不是鉴定。所以用电泳的方法没办法做。呵呵。
5楼2012-09-12 21:35:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yy054120012 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +9 瞬息宇宙 2026-08-12 9/450 2026-08-13 10:12 by Vivilian
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +9 家与远方 2026-08-10 14/700 2026-08-13 09:41 by 臭臭不臭01
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
信息提示
请填处理意见