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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 用triton x-100都分不开的蛋白
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yy054120012

铁虫 (初入文坛)

[求助] 用triton x-100都分不开的蛋白

想请教各位童鞋。我做天然产物分离纯化，有几个蛋白杂在一起的复合物。在文库里都克隆了相关基因。我用加了triton x-100的缓冲buffer来过分子筛都无法将他们分开，怎么办呢？之前还用较高浓度的triton x-100处理过蛋白。但就是打不开他们的分子间作用。过下来的还是杂在一起。不知道有没有其他办法。
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1楼 2012-09-08 22:08:52
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以试试Tricin SDS-PAGE看看
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2楼2012-09-09 19:58:43
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ilxly

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以加适当SDS到buffer里面，0.5%-1%左右对蛋白不会变性
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3楼2012-09-10 12:02:35
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yy054120012

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ilxly at 2012-09-10 12:02:35
可以加适当SDS到buffer里面，0.5%-1%左右对蛋白不会变性

我也想到这点了。但是我用0.15%预处理样品。怎么都有絮状沉淀了？无比郁闷
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4楼2012-09-12 21:31:11
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yy054120012

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by reallpf at 2012-09-09 19:58:43
可以试试Tricin SDS-PAGE看看

你好， 呵呵，是这样的。我现在需要大量的获取蛋白，而不是鉴定。所以用电泳的方法没办法做。呵呵。
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5楼2012-09-12 21:35:34
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