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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 菜鸟请教各位虫大侠一点蛋白表达的知识，感激！！
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小小技术官

木虫 (正式写手)

[求助] 菜鸟请教各位虫大侠一点蛋白表达的知识，感激！！

无论用原核系统还是真核系统，在表达蛋白时都有两种选择，即胞内以包涵体的形式，或者分泌到胞外之后提取。但是对于目的蛋白，是根据什么来判断选择让目的蛋白分泌到胞外或者胞内表达的呢？
比如，我最近是想表达蛋白，然后利用蛋白作为抗原免疫动物，然后目的蛋白属于免疫球蛋白超家族，有两个结构域，以什么样的形式表达该蛋白更理想？为什么？
麻烦大家帮我出出主意，谢谢各位！
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生活是一面镜子，要笑着面对！
1楼 2012-09-06 10:36:37
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我不是稻草人

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般蛋白什么来源，就用什么表达体系。比如真核来源蛋白，那就用真核表达。
ps：哺乳动物细胞的蛋白表达有成包涵体的么？
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我不是稻草人
2楼2012-09-06 16:41:10
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hellokkzhu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小小技术官: 金币+1, ★有帮助, 系统全面，但是缺少细节性内容。 2012-09-07 01:15:44
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-09-07 13:36:32
2l有点不准确，其实现在大多重组蛋白都是大肠杆菌表达，还有一部分酵母表达，哺乳动物细胞大量制备重组蛋白成本还太高。
楼主如果是为了制备抗体的话，用原核表达抗原就可以，尽量分泌表达。包涵体复性太麻烦。重组蛋白如果合成的太快容易形成包涵体，所以表达时需要在温度，诱导试剂浓度等方面优化。
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3楼2012-09-06 17:26:07
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小小技术官

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hellokkzhu at 2012-09-06 17:26:07
2l有点不准确，其实现在大多重组蛋白都是大肠杆菌表达，还有一部分酵母表达，哺乳动物细胞大量制备重组蛋白成本还太高。
楼主如果是为了制备抗体的话，用原核表达抗原就可以，尽量分泌表达。包涵体复性太麻烦。重组 ...

嗯，多谢帮助！跟我的导师讲的差不多，最起码印象有了，多谢 多谢
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生活是一面镜子，要笑着面对！
4楼2012-09-07 01:13:12
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