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flychess

铜虫 (初入文坛)

[求助] Sephadex凝胶色谱法测定青霉素类高分子杂质的机理 已有2人参与

请教牛人:Sephadex凝胶色谱法测定青霉素类高分子杂质的机理,在操作时为什么要分别在缓冲盐和纯水中进行,为什么要加入葡聚糖2000?书上的原理都说的很笼统,能详细点吗?最近刚接触,发现很多都不懂。
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如猫似狗

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼上说的不错。
至于蓝色葡聚糖2000作用:是考察系统适用性,n,拖尾,保留时间重复性、R。什么测外水,我不觉得。它就是状态、分子量固定,不随流动相变化的组分。两种流动相保留基本一致。
9楼2014-03-20 16:54:03
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netscaner

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢 2012-09-06 09:10:08
Sephadex是分子排阻原理,不同分子量的分子在一定孔径的葡聚糖凝胶里保留的时间不一样。
天道酬勤!
2楼2012-09-06 08:39:42
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hhw_123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-09-06 19:08:16
主要是根据分子排阻法来进行的。主要是根据硅胶间的空隙及硅胶内的空隙进行分离的。硅胶间的缝隙较大而硅胶内的缝隙较小,因此大分子(聚合物)的东西不会进入硅胶内的缝隙,因此出峰较快;而小分子(单体)的东西则相反。
3楼2012-09-06 09:05:31
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hhw_123

金虫 (正式写手)

不好意思,习惯了。把凝胶说成硅胶了。特此更正!
4楼2012-09-06 09:08:02
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