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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » Sephadex G-100 凝胶用酒精泡过后怎么用
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carrol821122

金虫 (小有名气)

[求助] Sephadex G-100 凝胶用酒精泡过后怎么用 已有2人参与

Sephadex G-100 凝胶是新的，进行预处理后柱子堵上了，纯水都基本上不怎么走，就用75%的乙醇泡上了，之后耽搁很久想再用可以么？怎么处理啊？

预处理方法如下：
（1）在室温下，根据吸附柱（Φ2cm30cm）的体积，称取约 15g 的 Sephadex
G-100 凝胶，将其浸泡于 50-60%乙醇中至少 24h，并不断地搅拌以保证凝胶充
分溶胀，再用蒸馏水洗去残存的乙醇，滤干；
（2）在室温下，将 Sephadex G-100 凝胶在蒸馏水中浸泡 24h，间隙搅拌以保证
凝胶充分溶胀，然后用 0.1M HCl 浸泡 12h，间隙搅拌，滤干，再用蒸馏水洗至
中性；
（3）将溶胀好的 Sephadex G-100 凝胶经超声波作用脱气
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辛勤培育着
1楼 2014-03-18 21:36:28
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主厉害，不用的话保存在20%的酒精中就可以了，放在那么高浓度的酒精中，楼主还是重新装柱子吧
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2楼2014-03-19 14:19:56
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carrol821122

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lihuan0525 at 2014-03-19 14:19:56
楼主厉害，不用的话保存在20%的酒精中就可以了，放在那么高浓度的酒精中，楼主还是重新装柱子吧

重新装倒没什么，关键这个柱子能不能用了啊？现在平衡柱子流速1小时1毫升，简直了
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辛勤培育着
3楼2014-03-23 08:28:23
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

建议还是买新的吧

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2014-03-23 18:09:38
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

柱压过高 应该是超过填料的耐受压力了 导致填料崩塌了
所以 有必要考虑填料的真伪 如果是分装的 慎重对待吧 建议买GE的原装 虽然很贵
填料溶胀完毕 保存的时候 20%的酒精即可 长时间不使用 可以用0.2M NaOH 冲洗下
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太胖了！~
5楼2014-03-24 00:46:43
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carrol821122

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hsd3521 at 2014-03-24 00:46:43
柱压过高 应该是超过填料的耐受压力了 导致填料崩塌了
所以 有必要考虑填料的真伪 如果是分装的 慎重对待吧 建议买GE的原装 虽然很贵
填料溶胀完毕 保存的时候 20%的酒精即可 长时间不使用 可以用0.2M NaOH 冲洗下

谢谢了，我买的是一个小瓶装的，25g容量，目数是00-200.另外一个是40-120目的凝胶流速就很好，不知道为啥，是不是跟凝胶目数也有关系啊。而且第一个凝胶我用超声波排气，有人说会破坏凝胶结构，导致压塌。第二个我就用煮沸排气的，现在没事。但是第二个称量了15g,只溶胀到120ml，是不是溶胀不够 啊，竟是事，闹心。你对柱子很有研究啊，多交流交流呗
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辛勤培育着
6楼2014-03-24 08:15:09
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

排气冲真空即可 超声和磁力搅拌都会破坏填料。。另外的你的填料估计是国产的吧 好不好用不好说了
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太胖了！~
7楼2014-03-24 08:37:11
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carrol821122

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by hsd3521 at 2014-03-24 08:37:11
排气冲真空即可 超声和磁力搅拌都会破坏填料。。另外的你的填料估计是国产的吧 好不好用不好说了

请问，我用这个分离多糖，刚开始5-10几管，基本上糖都下来了，是不是没有挂住啊，为什么呢？是不是选择的柱子填料不对呢？请赐教啊
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辛勤培育着
8楼2014-04-05 19:12:48
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主
引用回帖:
8楼: Originally posted by carrol821122 at 2014-04-05 19:12:48
请问，我用这个分离多糖，刚开始5-10几管，基本上糖都下来了，是不是没有挂住啊，为什么呢？是不是选择的柱子填料不对呢？请赐教啊...

下了就是没挂住 必然与填料有关系 主要涉及到填料的真假 填料的带电性 多看看文献 多尝试几种吧
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太胖了！~
9楼2014-04-05 20:46:48
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zhl505221070

金虫 (小有名气)
想问一下，为什么G100溶胀的时候要用盐酸泡？
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10楼2016-07-12 16:02:55
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