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lzdx

木虫 (正式写手)

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[求助] 极性特别小，保留时间特别接近的怎么用hplc分离

RT，C8柱，用很大比例乙腈冲十多分钟才能出峰，基本上完全分不开的两个峰，有什么办法能分开啊

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1楼2012-08-31 17:36:32

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bcschina

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lzdx: 金币+3 2012-09-03 15:13:50
xbqewpq: 金币+3, 感谢应助，欢迎常来分析版交流 ^ ^ 2012-09-04 14:34:42

要分开两个峰不是靠一味增加柱子的保留能力楼上虫友的建议有些情况下是对的但显然不适用楼主这个case  问题的关键是要了解两个峰物质的差异和特性在哪里  然后再选择合适的柱子类型  再就是选择合适的柱子规格。听好了以下才是真正高手的建议  哈哈：
1.先选择一个梯度当然是高乙腈或者高乙醇的  看看乙腈和甲醇的梯度洗脱下  哪个分离效果更好  做到心中有底梯度洗脱在无法找到高效柱子的时候  是一个很好的提高柱效的补救办法  不要只顾用乙腈  甲醇也可以试试；
2.不需再要换普通C18 因为这样对两个物质的保留能力都再提升长的保留时间反而会使两个峰重叠更厉害个人推荐碳8亚2微米的短柱不要小看这类短柱柱效是很赞的亚2微米可保证柱效而且短柱确保缩短保留时间当然你的HPLC的系统必须是适合亚2微米的  注意连线的管径大小和真空机以及系统背压
3.以上还是不行  就要考虑换不同固定相的柱子氰基柱氨基柱  这些保留能力都比C8稍弱  但很可能适宜你两物质的分离  还有要注意是否是羟基封端  有时也会影响保留能力
以上  希望对你有用