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极性特别小，保留时间特别接近的怎么用hplc分离
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| RT，C8柱，用很大比例乙腈冲十多分钟才能出峰，基本上完全分不开的两个峰，有什么办法能分开啊 |
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lzdx: 金币+3 2012-09-03 15:13:50
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要分开两个峰 不是靠一味增加柱子的保留能力 楼上虫友的建议有些情况下是对的 但显然不适用楼主这个case 问题的关键是要了解两个峰物质的差异和特性在哪里 然后再选择合适的柱子类型 再就是选择合适的柱子规格。听好了 以下才是真正高手的建议 哈哈 ： 1.先选择一个梯度 当然是高乙腈或者高乙醇的 看看乙腈和甲醇的梯度洗脱下 哪个分离效果更好 做到心中有底 梯度洗脱在无法找到高效柱子的时候 是一个很好的提高柱效的补救办法 不要只顾用乙腈 甲醇也可以试试； 2.不需再要换普通C18 因为这样对两个物质的保留能力都再提升 长的保留时间反而会使两个峰重叠更厉害 个人推荐碳8亚2微米的短柱 不要小看这类短柱 柱效是很赞的 亚2微米可保证柱效 而且短柱确保缩短保留时间 当然 你的HPLC的系统必须是适合亚2微米的 注意连线的管径大小和真空机以及系统背压 3.以上还是不行 就要考虑换不同固定相的柱子 氰基柱 氨基柱 这些保留能力都比C8稍弱 但很可能适宜你两物质的分离 还有要注意是否是羟基封端 有时也会影响保留能力 以上 希望对你有用 |
5楼2012-09-03 14:11:52
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