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lxy5611

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教一些关于葡聚糖凝胶的一些问题。

我们实验室用的LH-20的,以前一直是用氯仿/甲醇1:1或3:2来等度过凝胶柱的。现在分离正丁醇部位,氯仿甲醇样品就溶解不了了,得用甲醇水了。。。现在我有以下疑问:1.用甲醇水来过柱,是要等度还是要梯度,梯度的话如何设置比较好?
2我现在换系统,凝胶还需要再用甲醇水来溶胀吗?
3.我尝试过了梯度,最大的问题就是柱子很容易进气泡,有裂痕,重装很麻烦的,不想啊。
请教各位,谁有好的用甲醇水过凝胶的经验不吝赐教,小弟万分感谢。
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xiaoxiao270

至尊木虫 (著名写手)

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凝胶我们都是等度的,下面放个自动收集器,梯度和等度区别不是很明显,梯度能跑开等度滴慢点也能跑开
分离、分离
2楼2012-08-29 15:02:11
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guozinina

新虫 (小有名气)

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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-08-30 20:53:58
凝胶最好是等度洗脱,不容易产生气泡。在换系统之前,一定要充分溶胀
3楼2012-08-29 15:31:17
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lxy5611

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by guozinina at 2012-08-29 15:31:17
凝胶最好是等度洗脱,不容易产生气泡。在换系统之前,一定要充分溶胀

恩  是的 梯度太麻烦了谢谢了
4楼2012-08-30 11:25:30
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lixishan

木虫 (著名写手)

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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-08-30 20:54:08
我们用甲醇水过凝胶时也会经常换梯度,不过得慢慢过渡,防止柱子裂缝
5楼2012-08-30 15:46:42
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火箭穿屁屁

木虫 (正式写手)

地球球长

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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-08-30 20:54:13
你的样品极性较大 甲醇水是个不错的选择 一定要等度洗脱 梯度的问题很大 楼上也说了 比如气泡 比如混合生热等等,用纯甲醇饱和LH20后装样 然后洗脱至上样比例 然后开始就可以了 很简单
绳命是入次的井猜
6楼2012-08-30 18:09:17
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