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baihua1990木虫 (小有名气)
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[求助]
takara 的CIAP去磷酸化处理可靠吗
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我使用TAKARA 的CIAP对sal1单酶切的VR1012质粒去磷酸化处理,处理完之后使用的PCR清洁试剂盒回收,然后和一个外源的4500bp的目的片段连接(质粒4915bp),对照组(只有去磷酸化处理的VR,无目的片段)有许多自连的单克隆。实验组跳了几十个单克隆验证 也都是自连的。 是不是酶有问题?用清洁试剂盒回收而不是按照说明书上的酚,氯仿,异戊醇抽提不会有影响吧? |
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