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不要回头

铜虫 (初入文坛)

[求助] 石蜡切片染色问题

在做根横切面的石蜡切片,但是染色一直染不好,首先脱蜡时两个二甲苯,一个20Min,一个10min,二甲苯+酒精15Min,这个时间应该是充分的吧,另外,染色剂是番红-固绿(番红是水溶液,固绿是酒精溶液),刚开始以为番红时间太短了,就从1.5H开始,后来一直染不好就加到了过夜,还是染不好,染番红后进行酒精脱水时颜色逐步褪去直到没有了,脱水时间是每级30min,事实上后来时间还缩短到15分钟的脱水时间。依然染不好,不知道问题现在到底在那一块呢。
  而且最近发现在显微镜下看,切出的片子细胞大多破碎的,我95%酒精脱水1个小时,2个100%酒精脱水共才1个小时,二甲苯和酒精混合液45Min,两个二甲苯共1小时,感觉脱水和透明时间并不长,现在就不知道问题出哪里了,明明肉眼看片子还是完整的,显微下居然都是破碎的。

[ Last edited by 不要回头 on 2012-9-3 at 13:32 ]
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chenhuize

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


不要回头: 金币+1, 有帮助 2012-09-15 19:49:11
番红固绿染色需要那么长的时间?切片破碎可能是由于包埋浸蜡不到位。我见有实验室用的是专门做石蜡切片的莱卡的那一套,从包埋到染色到切片,很方便的。
2楼2012-09-13 20:28:17
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