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不要回头

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 石蜡切片染色问题

在做根横切面的石蜡切片，但是染色一直染不好，首先脱蜡时两个二甲苯，一个20Min，一个10min,二甲苯+酒精15Min，这个时间应该是充分的吧，另外，染色剂是番红-固绿（番红是水溶液，固绿是酒精溶液），刚开始以为番红时间太短了，就从1.5H开始，后来一直染不好就加到了过夜，还是染不好，染番红后进行酒精脱水时颜色逐步褪去直到没有了，脱水时间是每级30min，事实上后来时间还缩短到15分钟的脱水时间。依然染不好，不知道问题现在到底在那一块呢。
而且最近发现在显微镜下看，切出的片子细胞大多破碎的，我95%酒精脱水1个小时，2个100%酒精脱水共才1个小时，二甲苯和酒精混合液45Min，两个二甲苯共1小时，感觉脱水和透明时间并不长，现在就不知道问题出哪里了，明明肉眼看片子还是完整的，显微下居然都是破碎的。

[ Last edited by 不要回头 on 2012-9-3 at 13:32 ]

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