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19870224dan金虫 (小有名气)
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[求助]
体内代谢物的分离
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各位有经验的哥哥姐姐： 我要做体内药物代谢物的分离鉴定，检测发现代谢物很少的，大概为原形药物量的4%。 LC-MS/MS提供的信息量很有限，所以我想通过HNMR进一步确证其结构，但从LC的分离情况（尝试了很多分离条件）三个代谢物都几乎叠加在一起，如果在这种前提下如何做HNMR呢？ 传统的办法是分离出纯品，再去做鉴定。那么（1）我如何得到较多的代谢物呢？体外微粒体孵育不能得到这三种代谢物，而化学合成又很不现实~~（2）那三个代谢物理化性质很接近（通过C18柱的保留行为推断，保留时间差值为0.2-0.3min），制备液相可以分离出来吗，还是柱层析呢?好迷茫啊 恳请大家指点迷津！谢绝灌水 |
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