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关于基因敲除设计引物有疑问,求高手。pET28a (+)卡那抗性基因的FRT在什么位置
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yyazmzr
银虫
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求助
]
关于基因敲除设计引物有疑问,求高手。pET28a (+)卡那抗性基因的FRT在什么位置
已有1人参与
刚接触基因敲除这一块,有些不太懂,想从pET28a(+)上扩增卡那基因来敲掉我的目的基因,可是却找不到它上面卡那抗性基因的FRT位点在哪里,找不到序列,不知道怎么设计引物来着,这个FRT位点要怎么找啊。还有一个问题就是同源臂,能直接把我基因的上游片段接在我的抗性基因的上游引物吗?用不用互补一下
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1楼
2012-08-21 20:23:25
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mengbiotech
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专业: 环境微生物学
同问帮顶。。。
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2楼
2012-08-21 21:12:53
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yyazmzr
银虫
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虫号: 1832916
注册: 2012-05-24
性别:
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专业: 生物大分子结构与功能
急切中……请高手解惑
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼
2012-08-22 07:53:11
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紫玉寒willie
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专业: 微生物遗传育种学
【答案】应助回帖
有专门的质粒,pKD4就是kan抗性的,且两端带有FRT位点。可以看看One-step inactivation of chromosomal genes in Escherichia coliK-12 using PCR products这篇文章
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4楼
2014-01-20 13:22:14
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