应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助啊，有DNA浓度，没有目的条带
52/1返回列表
查看: 1824  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

萌主李萌萌

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助啊，有DNA浓度，没有目的条带

P了好几天没有结果。。。
阳性对照检验PCR体系没有问题，觉得DNA没提出来，今天换方法提了一次测浓度是74.57微克每毫升，P完之后又测浓度是10000多，可是电泳还是没有条带啊！PS：阳性对照和我的目的片段差不多大，它却出来了，请各位大神分析一下问题在哪里啊？多谢了。。。
回复此楼

» 猜你喜欢
互相学习，共同进步
1楼 2012-08-21 15:20:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

萌主李萌萌

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by sd3824289 at 2012-08-24 10:11:37
建议如下：
1、将PCR重新做一次，做好记录（每个成分的量都加了多少）！
2、需要空白对照！
3、建议做一下温度梯度！P不出来的原因有一点可能就是因为退火温度过高，导致特性过高！

嗯，非常感谢~
回复此楼
互相学习，共同进步
13楼2012-08-24 17:06:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

gungunak47

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-08-21 16:26:24
萌主李萌萌: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢你 2012-08-22 18:17:34
1.DNA可能是降解了，可以先检测一下DNA的质量，只测浓度的话不能说明DNA的提取质量，因为降解的DNA浓度也会很高，电泳+数据才更能说明问题。
2.P完之后测的浓度时1000多，这也属于正常，因为体系中有dNTIPs，还有DNA模板，测出来的浓度大也属于正常。
3.只有数据+电泳图才能说明问题，任何单独一个都不是很能说明提取质量。
赞一下 回复此楼
2楼2012-08-21 15:44:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王礼鹏

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-08-21 16:26:34
amisking: 回帖置顶 2012-08-21 20:02:01
萌主李萌萌: 金币+1, ★★★很有帮助, 多谢高手指教~ 2012-08-22 18:18:04
1、PCR后测DNA溶度是不太靠谱的，因为体系中有引物，dNTPs，还有模板，这都会导致你所测得溶度偏高。
2、可能的原因引物有问题，或试着去设置一个退火温度；Mg离子溶度过低，使聚合酶的活性下降，产物减少。当然，如果你的上样量是是根据你测得DNA溶度而推出的话，建议你上样时多上点。。。。。。
赞一下 回复此楼
3楼2012-08-21 16:01:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

萌主李萌萌

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gungunak47 at 2012-08-21 15:44:28
1.DNA可能是降解了，可以先检测一下DNA的质量，只测浓度的话不能说明DNA的提取质量，因为降解的DNA浓度也会很高，电泳+数据才更能说明问题。
2.P完之后测的浓度时1000多，这也属于正常，因为体系中有dNTIPs，还有D ...

先谢谢你，可是P完之后浓度是10000多，这也算正常吗？
赞一下 回复此楼
互相学习，共同进步
4楼2012-08-21 18:31:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭