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insaint12809

铁虫 (初入文坛)

[求助] 虫友们帮帮忙,看一下我的内标标准曲线法实验步骤有什么问题!!!

1.准备3根1ml移液管,分别用于移取内标储备液,混标储备液和各个梯度稀释液;

2.混标储备液:使用10ul GC进样器分别移取六种标准品各4ul于10ml容量瓶中,用1ul GC进样器移取0.3ul 内标于该容量瓶中,定容即为400ul/L(含30ul/L BB)储备液;

3.内标储备液:取0.3ulBB于10ml容量瓶中定容,既得30ul/L内标储备液;

4.准备具塞小瓶若干,移取步骤2中1ml混标储备液与步骤3中1ml 内标储备液于小瓶中,既得200ul/L第一梯度稀释液,使用溶剂润洗10ul 进样器4次,用该梯度稀释液清洗4次后取1ul 进样测试(重复2次);

5.移取第一梯度稀释液1ml与内标储备液1ml 于小瓶中既得100ul/ml 第二梯度稀释液,依照步骤4方法洗针进样;

6.其余梯度与步骤5同。

基本思路就是前一个梯度的标液在使用完后用于配制下一个梯度。
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sunnyhy1981

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xbqewpq: 金币+2, 感谢应助,欢迎常来分析版交流 ^ ^ 2012-08-22 08:51:29
insaint12809: 金币+6, ★★★很有帮助 2012-08-22 10:24:38
insaint12809: 回帖置顶 2012-08-22 10:24:55
基本没问题:
1,“混标”,把内标储备液多配一点,标准品直接用内标储备液定容;

2,你的6.其余梯度与步骤5同。意思是逐级稀释吗?严格来讲,这样操作的话最好用新的吸管和进样针,而且由浓往稀的顺序也是不对的;
建议可以用一根移液管通过移取不同体积的方式来实现浓度梯度,例如1,2,5,10mL,再用内标储备液稀释定容。进样呢,可以先稀后浓。
2楼2012-08-21 12:18:42
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mhs236

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xbqewpq: 金币+1, 残留是很烦人的 2012-08-22 08:52:07
insaint12809: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-08-22 10:24:49
同意楼上的 一般配系列浓度的时候是逐级稀释,进样的时候是从低浓度到高浓度的,所以应该先近低浓度的
3楼2012-08-22 08:42:19
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