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insaint12809铁虫 (初入文坛)
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[求助]
虫友们帮帮忙，看一下我的内标标准曲线法实验步骤有什么问题！！！
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1.准备3根1ml移液管，分别用于移取内标储备液，混标储备液和各个梯度稀释液； 2.混标储备液：使用10ul GC进样器分别移取六种标准品各4ul于10ml容量瓶中，用1ul GC进样器移取0.3ul 内标于该容量瓶中，定容即为400ul/L（含30ul/L BB）储备液； 3.内标储备液：取0.3ulBB于10ml容量瓶中定容，既得30ul/L内标储备液； 4.准备具塞小瓶若干，移取步骤2中1ml混标储备液与步骤3中1ml 内标储备液于小瓶中，既得200ul/L第一梯度稀释液，使用溶剂润洗10ul 进样器4次，用该梯度稀释液清洗4次后取1ul 进样测试（重复2次）； 5.移取第一梯度稀释液1ml与内标储备液1ml 于小瓶中既得100ul/ml 第二梯度稀释液，依照步骤4方法洗针进样； 6.其余梯度与步骤5同。 基本思路就是前一个梯度的标液在使用完后用于配制下一个梯度。 |
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xbqewpq: 金币+2, 感谢应助，欢迎常来分析版交流 ^ ^ 2012-08-22 08:51:29
insaint12809: 金币+6, ★★★很有帮助 2012-08-22 10:24:38
insaint12809: 回帖置顶 2012-08-22 10:24:55
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基本没问题： 1，“混标”，把内标储备液多配一点，标准品直接用内标储备液定容； 2，你的6.其余梯度与步骤5同。意思是逐级稀释吗？严格来讲，这样操作的话最好用新的吸管和进样针，而且由浓往稀的顺序也是不对的； 建议可以用一根移液管通过移取不同体积的方式来实现浓度梯度，例如1，2，5，10mL，再用内标储备液稀释定容。进样呢，可以先稀后浓。 |
2楼2012-08-21 12:18:42
3楼2012-08-22 08:42:19