24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3141  |  回复: 27

761429495

新虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by dshlove at 2012-08-21 16:33:20
前面的步骤没必要,你验证加上去之后,不还要切下来再连到9K上,费那劲,还不如你直接在9K上连接。
给你个大致步骤:
多提点9K的质粒,也用双酶切处理,做载体。你的PCR产物酶切之后,直接用T4连接酶往载体上连接 ...

如果这样的话在给引物加组氨酸标签序列的同时就要加上酶切位点和保护碱基,这样引物是不是太长了啊
每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
21楼2012-08-21 16:50:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
21楼: Originally posted by 761429495 at 2012-08-21 16:50:36
如果这样的话在给引物加组氨酸标签序列的同时就要加上酶切位点和保护碱基,这样引物是不是太长了啊...

我自己做的时候,设计的引物60多碱基呢。没办法其他的太费时间了。
22楼2012-08-21 17:01:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王礼鹏

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你表达的蛋白是不是已经加了组氨酸标签?如果是的话,做个WB或anti-his的抗体检查就可以判断标签是否表达,当然也可以判断是否加到目的基因上。祝实验顺利。。。。
23楼2012-08-22 09:16:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lela

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我想知道毕赤酵母表达出来的目的蛋白是与载体连接在一起的,还是只有目的蛋白啊
24楼2012-12-12 12:59:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lela

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

含有组氨酸标签的目的蛋白的纯化到底组氨酸标签是在载体上,还是在目的蛋白上啊啊,纯化的那个到底是单一目的蛋白,还是连接在载体上的蛋白啊
25楼2012-12-12 13:01:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangyang16

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by dshlove at 2012-08-20 14:31:12
粗酶液是什么?我们还不知道你的基因是干嘛的呢,说详细点,不然帮不上。...

你们说的这个我很感兴趣,我还有个问题就是组氨酸标签加在N端好还是C端好呢?
26楼2015-07-07 22:32:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangyang16

新虫 (初入文坛)

加在N端和C端有什么区别没?哪个更好
27楼2015-07-07 22:35:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hajierlove

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我也想问问两端的his标签哪个更好

[ 发自小木虫客户端 ]
踏实
28楼2015-07-08 00:10:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 761429495 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 322求调剂 +3 嗯哼哼恒 2026-04-05 3/150 2026-04-05 19:52 by nepu_uu
[考研] 280求调剂 +4 李rien 2026-04-04 4/200 2026-04-05 18:44 by imissbao
[考研] 求调剂到0856材料工程 +3 程9915 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:15 by 蓝云思雨
[考研] 电子信息调剂交叉学科有推荐吗 +6 jhtfeybgj 2026-04-01 9/450 2026-04-05 11:13 by 猪会飞
[考研] 求调剂 +4 晟功? 2026-04-03 4/200 2026-04-04 21:58 by hemengdong
[考研] 化学308分调剂 +23 你好明天你好 2026-03-30 24/1200 2026-04-04 18:29 by macy2011
[考研] 一志愿南农090401,268,求调剂 +5 一木鸟然 2026-04-04 5/250 2026-04-04 17:07 by babysonlkd
[考研] 求调剂:085600材料与化工,考材科基,总分319 +21 678lucky 2026-03-31 26/1300 2026-04-04 16:22 by dongzh2009
[考研] 0703求调剂 +6 zizimo 2026-03-31 6/300 2026-04-04 14:16 by 无际的草原
[考研] 考研调剂 +5 小sun要好运 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:43 by 啵啵啵0119
[考研] 070300一志愿211,312分求调剂院校 +16 小黄鸭宝 2026-03-30 16/800 2026-04-03 19:53 by lijunpoly
[考研] 求调剂不挑专业 +3 xrh030412 2026-04-01 3/150 2026-04-03 14:40 by 氮气气气
[考研] 085600专硕材料与化工348分求调剂 +10 上学啦! 2026-04-01 11/550 2026-04-03 14:13 by 百灵童888
[考研] 283求调剂 +3 jiouuu 2026-04-03 4/200 2026-04-03 13:28 by jiouuu
[考研] 282求调剂 +5 呼吸都是减肥 2026-03-31 5/250 2026-04-03 12:03 by 1753564080
[考研] 286分调剂 +20 Faune 2026-03-30 22/1100 2026-04-02 13:24 by clyblh
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-03-31 11/550 2026-04-01 22:25 by zhouyuwinner
[考研] 279求调剂 +7 莫xiao 2026-04-01 7/350 2026-04-01 22:05 by 客尔美德
[考研] 食品学硕362求调剂 +3 xuanxianxian 2026-04-01 3/150 2026-04-01 21:05 by 啊李999
[考研] 085404 22408 315分 +5 zhuangyan123 2026-03-31 6/300 2026-03-31 13:48 by limeifeng
信息提示
请填处理意见