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761429495

新虫 (小有名气)

[求助] 组氨酸标签的问题已有1人参与

亲,怎样验证组氨酸标签有没有加到目的基因上,初学者 ,求指导
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每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
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761429495

新虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by dshlove at 2012-08-21 16:33:20
前面的步骤没必要,你验证加上去之后,不还要切下来再连到9K上,费那劲,还不如你直接在9K上连接。
给你个大致步骤:
多提点9K的质粒,也用双酶切处理,做载体。你的PCR产物酶切之后,直接用T4连接酶往载体上连接 ...

如果这样的话在给引物加组氨酸标签序列的同时就要加上酶切位点和保护碱基,这样引物是不是太长了啊
每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
21楼2012-08-21 16:50:36
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alarace

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
将连好的质粒送公司测序就可以知道是否连上标签了
2楼2012-08-19 21:10:45
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761429495

新虫 (小有名气)

谁能给我说说从目的基因开始加组氨酸标签开始一直到粗酶液的获得大体有哪些步骤啊
每一个让你讨厌的现在,都有一个不努力的曾经。
3楼2012-08-19 21:16:32
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by 761429495 at 2012-08-19 21:16:32
谁能给我说说从目的基因开始加组氨酸标签开始一直到粗酶液的获得大体有哪些步骤啊

粗酶液是什么?我们还不知道你的基因是干嘛的呢,说详细点,不然帮不上。
4楼2012-08-20 14:31:12
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