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Trizol法提取细胞总RNA步骤 从-80中取出加了Trizol的样品,室温解冻后加入20ul氯仿,剧烈震荡30s,室温静置10min,12000转、4摄氏度、10min。 取上清加到另一个EP管中,加入500ul异丙醇,混匀,室温静置10min,12000转、4摄氏度、10min。 小心弃掉上清,加入1ml75%的酒精洗涤(75%酒精配置时用的是最后溶解RNA时用的那个DEPC处理水) 重复步骤3一次 弃掉上清,室温下倒置3-5min,使酒精挥发掉 加入40ulDEPC水溶解RNA 注:.盛装试剂的瓶子用DEPC水处理过, 枪头用的是买的 也试过用我自己用DEPC处理的水来配置酒精和回收RNA,但是效果都不好,所 以现在就用买的那种DEPC处理水配置酒精和回收RNA 帮我看看哪里有问题,今天提了一次什么都没有 |
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2012-08-11 19:20:25, 10.5 K
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