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zhaoyanying

铜虫 (初入文坛)

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Trizol法提取细胞总RNA步骤
从-80中取出加了Trizol的样品,室温解冻后加入20ul氯仿,剧烈震荡30s,室温静置10min,12000转、4摄氏度、10min。
取上清加到另一个EP管中,加入500ul异丙醇,混匀,室温静置10min,12000转、4摄氏度、10min。
小心弃掉上清,加入1ml75%的酒精洗涤(75%酒精配置时用的是最后溶解RNA时用的那个DEPC处理水)
重复步骤3一次
弃掉上清,室温下倒置3-5min,使酒精挥发掉
加入40ulDEPC水溶解RNA


注:.盛装试剂的瓶子用DEPC水处理过,
         枪头用的是买的
         也试过用我自己用DEPC处理的水来配置酒精和回收RNA,但是效果都不好,所     以现在就用买的那种DEPC处理水配置酒精和回收RNA
       
帮我看看哪里有问题,今天提了一次什么都没有
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  • 2012-08-11 19:20:25, 10.5 K

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starseacow

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
SongQ5285: 金币+3, 专业 2012-08-11 20:19:33
1 EP管也需要DEPC处理,枪头是买来RNase free的么?
2 1 ml Trizol应加入200 微升氯仿,楼主写错了?
3 楼主指的什么都没有是跑电泳没有条带,还是在EP管中看不到沉淀,后者很正常。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2012-08-11 19:37:46
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