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scutphoenix

木虫 (正式写手)

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[求助] TA克隆测序结果老是显示空载，这是为什么呢？？

一般的TA克隆，挑选白斑，菌落PCR阳性，送测序，结果老是空载，这是为什么呢？？谢谢

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1楼2012-08-10 22:37:50

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13332465896

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

9楼: Originally posted by xuyihui2001 at 2012-08-14 16:32:28
如果是菌落PCR容易产生假阳性(你原来连接产物粘在菌落上),所以你要先挑菌落传一次,然后取菌液做PCR.这样不会有假阳性.
如果是连接不上,考虑你的扩增酶是高保真酶,不能产生非特异的PolyA尾巴.

你好，我想请教一下。我做的菌落PCR也一直出现假阳性，我在出现单菌落后已经转接了一次单菌落到新的抗性平板上，但还是出现假阳性，测序结果还是空载。请问是什么原因造成的呢？