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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » TA克隆测序结果老是显示空载，这是为什么呢？？
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scutphoenix

木虫 (正式写手)

[求助] TA克隆测序结果老是显示空载，这是为什么呢？？

一般的TA克隆，挑选白斑，菌落PCR阳性，送测序，结果老是空载，这是为什么呢？？谢谢
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1楼2012-08-10 22:37:50
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budinggguodu

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

菌落PCR用通用引物P一次i 特异性引物P一次是不是确保性更大些啊
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11楼2013-01-25 16:55:27
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robert-RBT

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR阳性，有对照吗，影响PCR结果的因素很多。如果确信是阳性的菌落，不妨提质粒验证一下再测序。
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2楼2012-08-10 23:29:50
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scutphoenix

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by robert-RBT at 2012-08-10 23:29:50
PCR阳性，有对照吗，影响PCR结果的因素很多。如果确信是阳性的菌落，不妨提质粒验证一下再测序。

有对照，并且也不是所有的菌落都是阳性的。
因为做的是TA克隆，所以就没提质粒。
有同学也发生类似的现象，换家测序公司居然就解决了，但我想不通是为什么。
当然，我的可能也不是这种情况。
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3楼2012-08-11 07:17:56
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scutphoenix

木虫 (正式写手)
提高金币，等待大家的帮助：）
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4楼2012-08-12 21:25:42
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