应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 由谁用过pcDNA™3.1 Directional TOPO®载体吗
71/1返回列表
查看: 673  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhanglixuan

铜虫 (小有名气)

[交流] 由谁用过pcDNA™3.1 Directional TOPO®载体吗 已有3人参与

我最近把一个长度为1818bp的基因连接到pcDNA™3.1 Directional TOPO®载体上连接20微升体系，全部转入top10感受态细胞中转化后氨苄板上长了大概100个左右的单克隆，阴性对照板上没长菌落，我挑取了24个单克隆做pcr鉴定全是阴性的我想问一下这个载体的假阳性率是不是特别高？还有就是我应该怎样在继续下一步的实验
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-08-09 15:46:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山轻水秀

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我最近也在用这个载体，哇，测序全是阴性的，你的结论似乎正确。最近正试图改变连接比例来看看吧，希望我们都早日连上
赞一下 回复此楼
万变不离其宗，以明确的计划，灵活的方法，创造属于自己的天地
2楼2012-08-09 15:48:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhanglixuan

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 山轻水秀 at 2012-08-09 15:48:31
我最近也在用这个载体，哇，测序全是阴性的，你的结论似乎正确。最近正试图改变连接比例来看看吧，希望我们都早日连上

首先：感谢您的回复
其次：改变连接比例能行吗？你连接多长时间？上次我连接了1个小时，是不是连接时间太长了造成的这样的结果。还有就是能通过别的方法筛选吗？这家阳性率也太高了
赞一下 回复此楼
3楼2012-08-10 10:19:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山轻水秀

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhanglixuan at 2012-08-10 10:19:11
首先：感谢您的回复
其次：改变连接比例能行吗？你连接多长时间？上次我连接了1个小时，是不是连接时间太长了造成的这样的结果。还有就是能通过别的方法筛选吗？这家阳性率也太高了...

绝对不是你连接时间长，我平常连2小时，我这的老师经常连3小时，网上很多前辈们有很多4度过夜呢。再想想其他办法吧。似乎没有别的方法筛选了吧，抗性一般挺直观的
赞一下 回复此楼
万变不离其宗，以明确的计划，灵活的方法，创造属于自己的天地
4楼2012-08-10 15:01:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhanglixuan

铜虫 (小有名气)
???????:
4?: Originally posted by ?????? at 2012-08-10 15:01:44
?????????????????????????2С?????????????????3С???????????????к??4????????????????????ɡ??????б???????????????????????...

лл?????о?????????????????????????°??????????????????????????
赞一下 回复此楼
5楼2012-08-13 10:38:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ivyvampire

新虫 (正式写手)
同志们连上没啊
回复此楼
6楼2014-01-06 17:32:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

niu_niu123

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
连接pcdna，菌液pcr检测时也是感觉有好多假阳性。
赞一下 回复此楼
7楼2014-12-25 11:35:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhanglixuan 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 本子写完了，给DS兄弟看了，得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:32 by L135790
[考研] 292求调剂 +6 yhk_819 2026-02-28 6/300 2026-03-01 23:23 by 向上的胖东
[考研] 0856调剂 +5 刘梦微 2026-02-28 5/250 2026-03-01 22:30 by wang_dand
[硕博家园] 博士自荐 +7 科研狗111 2026-02-26 11/550 2026-03-01 22:24 by 哲平L
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 12/600 2026-03-01 22:10 by 海嵙Y
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 0856求调剂285 +10 吕仔龙 2026-02-28 10/500 2026-03-01 21:37 by 公瑾逍遥
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂； 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 281求调剂 +4 2026计算机_诚心 2026-03-01 7/350 2026-03-01 17:20 by 2026计算机_诚心
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭