应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒转化与表达
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
52/1返回列表
查看: 2090  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

aofeng860308

木虫 (正式写手)

[求助] 质粒转化与表达

最近做一批重组质粒，测序正确。打算转rosetta和bl21做表达，然而经过好几次的折腾，就是一个菌不长。排除了感受态，抗性，质粒质量及操作过程中的问题，可是依然没能解决问题。我想问一下还有哪些可能的因素影响质粒的转化。还有一个问题，我做了一个NusA做融合伴侣的重组质粒，转化表达质粒成功后不表达，没有移码，用IPTG 0.5mM诱导3h，无任何表达。请大侠们帮忙看看到底是哪里出现了问题。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-08-09 10:00:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunliuxx

铁虫 (初入文坛)
请教：重组菌BL21(DE3)PET29A-ppA-表达,之前表达蛋白量SDS-PAGE很高，现在怎么都检测不到蛋白的表达，请教原因？
赞一下 回复此楼
14楼2012-09-20 05:33:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

无踪无影

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
aofeng860308: 金币+20, ★有帮助, 1 2012-08-09 21:50:22
小丹木木: 金币-19, 楼主收回多给的19个金币 2012-08-10 08:15:32
你这没长菌 会不会是菌被你涂板时候烫死了呢？
赞一下 回复此楼
一切皆有可能
2楼2012-08-09 15:24:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

山轻水秀

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流！ 2012-08-09 19:50:31
aofeng860308: 回帖置顶 2012-08-09 21:50:47
1.你确定你说的那些都没问题吗，比如抗性，会不会加多了，几乎都杀死了。
2.“重组质粒，测序正确”是什么意思？你的质粒本身就是已经重组完的吗？还是说pcr产物序列正确？如果你经过连接的话，是不是你连接的比例有误？
赞一下 回复此楼
万变不离其宗，以明确的计划，灵活的方法，创造属于自己的天地
3楼2012-08-09 15:46:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aofeng860308

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 无踪无影 at 2012-08-09 15:24:24
你这没长菌 会不会是菌被你涂板时候烫死了呢？

我很多时候不用涂布棒，直接摇匀的，也不长。
赞一下 回复此楼
4楼2012-08-09 21:44:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 6/300 2026-03-29 14:16 by Qshers
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +5 李李不服输 2026-03-26 5/250 2026-03-29 13:40 by 唐沐儿
[考研] 环境工程 085701，267求调剂 +3 minht 2026-03-29 3/150 2026-03-29 13:09 by mumin1990
[考研] 311求调剂 +5 冬十三 2026-03-24 5/250 2026-03-29 08:55 by qingfeng258
[考研] 311（085601）求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 0703化学求调剂 +9 奶油草莓. 2026-03-22 10/500 2026-03-28 13:30 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-27 8/400 2026-03-28 12:42 by 唐沐儿
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 考研调剂 +4 Sanmu-124 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:49 by kiokin
[考研] 一志愿华东理工大学081700，初试分数271 +6 kotoko_ik 2026-03-23 7/350 2026-03-27 12:29 by 惠州彭于晏
[考研] 调剂推荐 +5 清酒714 2026-03-26 6/300 2026-03-27 11:12 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 +6 林之夕 2026-03-24 6/300 2026-03-27 08:38 by hypershenger
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:04 by chemisry
[考研] 321求调剂 +6 wasdssaa 2026-03-26 6/300 2026-03-26 20:57 by sanrepian
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭