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wypbit

新虫 (初入文坛)

[求助] 拟南芥在多少peg浓度下可以正常生长 已有1人参与

我们实验室利用PEG模拟干旱,筛选拟南芥抗旱突变体,但把拟南芥幼苗从ms培养基上移到Peg平板之后,拟南芥基本没变化。都快十天了,拟南芥不死也不长,没有明显差别。(我们用的是55%的peg筛选)

实验方法:1.Peg配制:在三角瓶上刻好刻度,然后称好peg加入,然后加peg溶液(主要有ms粉和mes,ph5.7)溶解到刻好的地方。
2.peg板:先每个培养皿中加入20mlms培养基,然后再加30mlpeg溶液,静置12-15小时。

请教各为大神,peg浓度怎么样,实验操作有什么改进或不对的吗?筛选大概要多少天才会有明显差异或苗子死亡。
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主使用的PEG浓度是否过高?我看过的PEG干旱胁迫文章,印象里PEG浓度只有5%-15%。配置时最好直接在制备培养基时,直接根据比例加入PEG。楼主的做法稀释了培养基,一直处于无菌生长状态下的拟南芥幼苗比较脆弱,很可能因此无法生长。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
3楼2012-08-09 20:01:46
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wypbit

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by starseacow at 2012-08-09 20:01:46
楼主使用的PEG浓度是否过高?我看过的PEG干旱胁迫文章,印象里PEG浓度只有5%-15%。配置时最好直接在制备培养基时,直接根据比例加入PEG。楼主的做法稀释了培养基,一直处于无菌生长状态下的拟南芥幼苗比较脆弱,很可 ...

配置的方法不一样,5%到15%的是把peg直接混合在培养基里,我55%的只是把peg溶液静置在ms培养基上12小时,然后倒去多余溶液
4楼2012-08-13 09:03:26
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5楼2022-05-17 21:29:55
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景魏晋

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

在保持相同渗透压下,改变培养基成分试试看。
努力
6楼2022-07-01 21:38:51
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