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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 拖尾严重是为什么
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peijiawai

新虫 (初入文坛)

[求助] 拖尾严重是为什么

我做了一次pcr第一次出了结果，把第一次的有扩增产物的体系作为模版以后PCR就全是很严重的拖尾，为什么
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1楼 2012-08-06 08:26:53
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

healy13

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 鼓励 2012-08-08 07:51:10
本帖内容被屏蔽
2楼2012-08-06 10:29:56
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ghs25372216

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 可以梯度 2012-08-08 07:51:27
本帖内容被屏蔽
4楼2012-08-06 10:49:47
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普通回帖

healy13

禁虫 (小有名气)
1949stone: 直接用梯度 省时省力 2012-08-08 07:52:03
本帖内容被屏蔽
3楼2012-08-06 10:30:49
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karin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是你的模板浓度高了，把模板适度稀释再做。
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坚持就是胜利
5楼2012-08-06 11:22:36
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霹雳光

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
怎么不上图啊！这个原因挺多的
赞一下 回复此楼
事实证明，除了你自己，不要指望任何一个人
6楼2012-08-06 12:02:12
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eargle

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 同意 2012-08-08 07:52:18
最主要可能是非特异性PCR产物过多了，可以适当提高一下退火温度。最好做个梯度退火。
赞一下 回复此楼
结识每个虫友，将是我的又一大荣幸！
7楼2012-08-07 00:41:16
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sd3824289

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以选择一下电泳时的电压！调整一下！
赞一下 回复此楼
坚持，就像流星，即使知道最后的结果，也要勇敢的走到最后！
8楼2012-08-07 09:23:41
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匿名

用户注销 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: touch down 可以 不过建议梯度 2012-08-08 07:52:46
本帖仅楼主可见
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9楼2012-08-07 13:00:19
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1949stone: maybe 2012-08-08 07:52:59
楼主第一次的结果如何，也是拖尾吗？
如果是，那么第二次就容易解释了，那么第一次的退火温度需要提高或者模板浓度需要降低。
如果不是，那么就只有考虑把PCR产物稀释后再做模板。
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10楼2012-08-07 19:29:15
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