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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » MTT法检测生物学活性注意点，按照2010药典3部做的，就是不成功啊
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dragonflydan

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
20楼: Originally posted by ppsfxn at 2012-08-09 12:18:58
数据发出来看下啊，图有么？

从左向右
              1          2          3         4          5
第1排    0.037   0.023   0.012   0.063   0.064
第2排    0.032   0.043   0.031   0.076   0.069
第3排    0.029   0.052   0.042   0.058   0.112
第4排    0.054   0.065   0.033   0.087   0.106
第5排    0.063   0.075   0.042   0.086   0.069
第6排    0.082   0.093   0.050   0.093   0.079
第7排    0.064   0.066   0.049   0.049   0.072
第8排    0.069   0.108   0.002      0          0
第8排后3孔是空白对照，1-2列是标准品
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只有想不到，没有做不到！加油@
21楼2012-08-09 16:46:05
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ppsfxn

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

看你的数据，趋势还是有的，你标准品是哪个公司的？比活性是多少？过期了么？标准品有被反复冻融过么？

你细胞怎么处理的，多少转速离心多久？ CTLL-2细胞较脆弱，建议低转速离心，清洗次数减少，比如只洗一次，操作轻缓一点。你养细胞用的IL-2呢？是你的样品么？如果不是，拿你养细胞用的IL-2来试试。

另外，你确定稀释样品全程都是用10%FBS RPMI1640的么？再次强调，血清很重要。希望有帮助。
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22楼2012-08-10 12:54:27
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dragonflydan

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
22楼: Originally posted by ppsfxn at 2012-08-10 12:54:27
看你的数据，趋势还是有的，你标准品是哪个公司的？比活性是多少？过期了么？标准品有被反复冻融过么？

你细胞怎么处理的，多少转速离心多久？ CTLL-2细胞较脆弱，建议低转速离心，清洗次数减少，比如只洗一次， ...

标准品是中检所的，99年的，24小时之后细胞状态也很好，2000IU稀释到200IU的，没有反复冻融。
细胞1000转1min，RPMI 1640洗2次。养细胞用的IL-2也做过几次实验，结果差不多。稀释液是10%FBS RPMI1640。
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只有想不到，没有做不到！加油@
23楼2012-08-10 16:34:24
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lilanluo

金虫 (著名写手)
不知道兄台MTT反应时间和温度以及溶解时间和温度是怎样的？我在50度反应没什么变化，在60甚至更高的温度才有蓝紫色的物质产生。但有很问题，http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=6858315。有空可以讨论讨论
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小硕毕业散户
24楼2014-01-08 17:30:03
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