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dragonflydan

金虫 (初入文坛)

[求助] MTT法检测生物学活性注意点,按照2010药典3部做的,就是不成功啊

MTT法检测生物学活性有哪些注意点,按照2010药典3部做的,就是不成功啊
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只有想不到,没有做不到!加油@
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ppsfxn

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

看你的数据,趋势还是有的,你标准品是哪个公司的?比活性是多少?过期了么?标准品有被反复冻融过么?

你细胞怎么处理的,多少转速离心多久? CTLL-2细胞较脆弱,建议低转速离心,清洗次数减少,比如只洗一次,操作轻缓一点。你养细胞用的IL-2呢?是你的样品么?如果不是,拿你养细胞用的IL-2来试试。

另外,你确定稀释样品全程都是用10%FBS RPMI1640的么?再次强调,血清很重要。希望有帮助。
22楼2012-08-10 12:54:27
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conanzzz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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yqbter: 金币+2, 鼓励发帖! 2012-08-03 13:28:47
不成功的现象结果是怎样的?

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2楼2012-08-02 09:36:45
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八戒八戒

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖! 2012-08-03 13:28:33
你想检测什么?MTT法的原理是通过检测活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶来进行细胞检测,这种方法的漏洞在于若是你的活性蛋白有可能是通过增加或者减少活细胞内的琥珀酸脱氢酶的数量或者活性并没有增加或者减少细胞的总体水平也会出现意想不到的结果

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3楼2012-08-02 11:40:26
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western虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖! 2012-08-03 13:29:03
MTT避光,加DMSO前,把液体吸干净,不能有细菌污染等,都会影响OD值

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ForDream!
4楼2012-08-02 12:27:13
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