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dragonflydan

金虫 (初入文坛)

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[求助] MTT法检测生物学活性注意点，按照2010药典3部做的，就是不成功啊

MTT法检测生物学活性有哪些注意点，按照2010药典3部做的，就是不成功啊

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只有想不到，没有做不到！加油@

1楼 2012-08-01 14:55:46

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dragonflydan

金虫 (初入文坛)

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送鲜花一朵
yqbter: 金币+2, 鼓励发帖! 2012-08-03 13:29:20

引用回帖:

3楼: Originally posted by 八戒八戒 at 2012-08-02 11:40:26
你想检测什么？MTT法的原理是通过检测活细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶来进行细胞检测，这种方法的漏洞在于若是你的活性蛋白有可能是通过增加或者减少活细胞内的琥珀酸脱氢酶的数量或者活性并没有增加或者减少细胞的总体 ...

白介素-2的活性，
A每孔加50μl基础培养基，空白对照加100μl基础培养基。
B 加标准品或供试品溶液：第一排加50μl 200IU的标准品或供试品，然后依次稀释取50μl加到下孔内，第七排吸出50μl弃掉，第八排不加IL-2。
C 细胞悬液制成5×105/ml，加基础培养基，混匀，每孔加细胞50μl，第8排做阴性对照。放入5%二氧化碳培养箱中37℃培养24h
D 将MTT用0.22μm滤膜过滤后，然后每孔加MTT 10μl，37℃ 5%二氧化碳培养箱中培养4-6h
E 每孔加10%SDS 100μl，37℃ 5%二氧化碳培养箱中培养20h。在570nm处测吸光度
我这样做有什么不对吗，就是不出想要的结果