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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » MTT法检测生物学活性注意点，按照2010药典3部做的，就是不成功啊
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dragonflydan

金虫 (初入文坛)

[求助] MTT法检测生物学活性注意点，按照2010药典3部做的，就是不成功啊

MTT法检测生物学活性有哪些注意点，按照2010药典3部做的，就是不成功啊
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只有想不到，没有做不到！加油@
1楼 2012-08-01 14:55:46
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ppsfxn

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是CTLL-2细胞么？有看过文献说是CTLL-2细胞要样3-4周才能对IL-2有反应，当然实际上不用那么久，我这边做过实验，大概2-3周就有反应了；

另外一个很严重的问题是你的基础培养基是有含血清的吗？我最初做IL-2也是因为稀释液没加血清，结果24h细胞基本全死了，后来加血清稀释就好了，96孔板对细胞因子吸附挺严重的，血清可以减少大部分的吸附，你可以加10%FBS到你的稀释液和细胞培养液再重复一次试试。希望对你有帮助。
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12楼2012-08-03 16:29:44
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ppsfxn

金虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by dragonflydan at 2012-08-04 11:08:32
是CTLL-2细胞，基础培养基一直是加10%FBS的...

你用的是标准品么还是自己生产的样品？如果是样品，建议你上标准品试试，可能是样品没活性也不一定
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15楼2012-08-06 11:53:50
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ppsfxn

金虫 (小有名气)
???????:
16?: Originally posted by dragonflydan at 2012-08-06 12:15:13
???????????????????????????MTT????????????????????????????????????????...

???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????95%???????4%Triton X-100??1%??????????Ч??????????????????
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18楼2012-08-06 15:41:55
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ppsfxn

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

数据发出来看下啊，图有么？
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20楼2012-08-09 12:18:58
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ppsfxn

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

看你的数据，趋势还是有的，你标准品是哪个公司的？比活性是多少？过期了么？标准品有被反复冻融过么？

你细胞怎么处理的，多少转速离心多久？ CTLL-2细胞较脆弱，建议低转速离心，清洗次数减少，比如只洗一次，操作轻缓一点。你养细胞用的IL-2呢？是你的样品么？如果不是，拿你养细胞用的IL-2来试试。

另外，你确定稀释样品全程都是用10%FBS RPMI1640的么？再次强调，血清很重要。希望有帮助。
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22楼2012-08-10 12:54:27
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